高山红景天叶肉原生质体分离培养和植株再生.pptVIP

高山红景天叶肉原生质体分 离培养与植株再生 小组成员： 张亚琴 赵校玲 祝志诚 赵 鑫 张可建 朱晓兰 曾 娟 张静静 张运浩 章登华 ;目的：利用高山红景天组培苗叶片分离 得到原生质体，经培养后获得再生植株。 ; 高山红景天;高山红景天人工 栽培利用的研究;高山红景天：; 一 材料和方法;2. 原生质体分离：;3.原生质体纯化：;4. 原生质体存活率及产量的测定：;5. 原生质体培养：;6.愈伤培养与植株再生:; 二、结果与分析;1.光照与黑暗;结果表明：在相同酶解条件下，光照与黑暗处理对高山红景天原生质体产量间差异不显著，因此，在进行原生质体分离以前，对组培苗是否光照不是影响原生质体产量的关键因素。在此实验中，直接采取没有进行黑暗预培养的组培苗进行原生质体分离。;2.叶片大小;在相同酶解条件下，长度大于1.5cm的叶片原生质体产量显著高于长度小于1.5cm的处理，因此，选用长度大于1.5cm的叶片为宜。;3.酶类组合 纤维素酶与果胶酶组合; 各处理存活率大小顺序为:1 4 5 2 7 3 8 6 9 各处理产量大小顺序为: 5 3 6 2 7 4 8 1 9 综合来看，处理5的产量显著高于其他处理，因此，采用处理5 的酶液组合（1%纤维素酶 + 0.5%果胶酶）可获得最大存活原生质体产量。;4.酶解时间与酶液中甘露醇浓度对高山红景天原生质体产量的影响：;时间影响：1~4 h随酶解时间的延长，原生质体产量递增，在4 h时达到最高值，以后随时间的延长，产量下降。 酶解后期的产量和存活率下降，是由于酶解液长时间浸泡造成部分原生质体破裂和损伤引起的。;酶液中甘露醇对原生质体产量和存活率的影响： 酶液中采用0.5 mol/L 甘露醇的处理经纯化后呈圆球型，可观察到大量叶绿体的存在。因此，酶液采用0.5 mol/L 的甘露醇用于维持原生质体渗透压效果较好。;高山红景天原生质体培养与植株再生：;高山红景天原生质体分离纯化、培养分化与植株再生;到此结束，谢谢！