水稻脱水蛋白启动子重组载体构建.doc

诚 信 声 明 本人郑重声明：所呈交的本科毕业论文是本人在指导老师的指导下，进行研究工作所取得的成果，成果不存在知识产权争议。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体在文中均作了明确的说明并表示了谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 毕业论文作者签名： 金明 2011 年 11月 26 目 录 TOC \o 1-3 \h \u HYPERLINK \l _Toc25880 缩写表. 1 HYPERLINK \l _Toc1731 摘要 2 HYPERLINK \l _Toc1731 关键词 2 HYPERLINK \l _Toc8203 1 前言 2 HYPERLINK \l _Toc9674 1.1非生物逆境对植物尤其是水稻等经济作物的影响 2 HYPERLINK \l _Toc31351 1.2植物抗逆性的研究方法 3 HYPERLINK \l _Toc17670 1.3启动子在植物抗逆性研究方面的理论和应用进展 3 HYPERLINK \l _Toc29609 1.4脱水蛋白家族在植物抗逆性方面的研究进展 5 HYPERLINK \l _Toc22504 1.5研究意义 5 HYPERLINK \l _Toc2103 2 材料与方法 6 HYPERLINK \l _Toc8667 2.1材料 6 HYPERLINK \l _Toc25849 2.1.1实验植物、菌株和质粒 6 HYPERLINK \l _Toc27058 2.1.2主要试剂 6 HYPERLINK \l _Toc14014 2.2主要仪器 7 HYPERLINK \l _Toc11680 2.3实验方法 7 HYPERLINK \l _Toc8148 2.3.1启动子RAB 16D的生物信息学分析 7 HYPERLINK \l _Toc12764 2.3.2 CTAB法提取水稻材料基因组 7 HYPERLINK \l _Toc14922 2.3.3目的片段PCR 8 HYPERLINK \l _Toc15392 2.3.4 PCR产物和pMD19-T载体的连接 8 HYPERLINK \l _Toc8499 2.3.5大肠杆菌的热激转化及扩大培养 9 HYPERLINK \l _Toc15978 2.3.6菌落PCR检测 9 HYPERLINK \l _Toc7395 2.3.7 Dehydrin基因启动子表达载体的构建 9 HYPERLINK \l _Toc15978 2.3.8大肠杆菌转化 10 HYPERLINK \l _Toc19659 2.3.9农杆菌冻融法转化、检测和菌种保存 10 HYPERLINK \l _Toc21007 2.4 农杆菌溶液的制备及侵染烟草叶盘 11 HYPERLINK \l _Toc24186 2.4.1 GUS活性检测 11 HYPERLINK \l _Toc4863 3结果与分析 11 HYPERLINK \l _Toc7377 3.1启动子区的调控元件分析 11 HYPERLINK \l _Toc11051 3.2启动子片段的克隆、酶切和农杆菌检测图 13 HYPERLINK \l _Toc22235 3.3相关载体物理图谱 15 HYPERLINK \l _Toc259 3.4 GUS活性染色结果 13 HYPERLINK \l _Toc9877 4 讨论 16 HYPERLINK \l _Toc1711 4.1启动子相关元件 16 HYPERLINK \l _Toc32030 4.2载体及其酶切位点的选择 16 4.3 GUS染色 HYPERLINK \l _Toc32030 16 HYPERLINK \l _Toc32030 5 结论 17 HYPERLINK \l _Toc32030 参考文献 17 HYPERLINK \l _Toc32030 致谢 20 HYPERLINK \l _Toc32030 附录 21 缩写表（Abbreviation） 缩写词 英文名 中文名 ABA Abscisci acid 脱落酸 Amp Ampicillin Sodium salt 氨苄青霉素 bp Base pair 碱基对 CTAB Cetyltrimethyl Ammonium Bromide 溴代十六烷基三甲胺 ddH2O Double Distilled Water 双蒸馏水 DNA Deoxyribonuc