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第15章 高效液相色谱法(HPLC)
High Performance Liquid Chromatography
一 概述
二 基本原理
三 固定相与流动相
四 反相色谱
五 仪器
六 应用和实例
第一节 概述
优 缺
经典LC 适用范围广 效率低，周期长
GC 高效、高速， 稳定，挥发性好
高灵敏度、自动化 仅20%能用GC
HPLC ：由经典LC→HPLC有三个突破
1、高效填料：5μm 10μm 高效 n=几万/m
2、高压泵输液 高速 0.1～10ml/min
3、高灵敏度的检测器 高灵敏度 10-9 g/ml （UV ）
(在线检测)
适用范围广 制成溶液，不需气化
流动相选择范围宽 组成、比例、盐浓度、pH
HPLC流程图
PUMP
Detector
Recorder
Waste
HPLC分类与经典LC同。
各国药典收载情况
USP 19版 1975年 7
20 76
21 340
22 871
23 1200+519+206
24 1386
ChP 1985 8
1990 76
1995 186
2000 257
发展迅速。
第二节 基本原理
(一）色谱峰展宽与柱效
1. 柱内展宽——范氏方程
H = A + B/u + Cu
5
HPLC ：B=2γDm 中Dm 比GC 中小10 倍，忽略第二项。
H=A+Cu = A+ （C +C ）u
s m
C dp 2 C dp 2
= 2λd + （ m s ）u 流动相＋静态流动相
p D D
降低H的途径：
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