大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型改良的实验研究.pdfVIP

第30卷 1期 宁夏医学院学报 2008年2月 Journal of Ningxia Medical College ·7 · 文章编号：1005—8486(2008)01—0007—04 · 论著· 大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型改良的实验研究 牛建国， 文玉军， 张莲香， 王效军，何仲义 (宁夏医学院基础学院人体解剖学教研室，银川 750004) 摘要：目的 通过对大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)再灌注模型神经功能缺失评分的 计算和脑梗死体积的测量，评价改良的大鼠MCAO再灌注模型，为实验研究提供可重复性好、稳定可靠的动物模 型。方法 20只sD大鼠随机分为A、B两组，A组用头端烧制成圆球的传统 “圆头线栓”，B组采用头端用万能 胶包裹成梭形膨大的改良“梭头线栓”制作大鼠MCAO模型，阻断大脑中动脉血供3h后将“线栓”拔出，造成再灌 注损伤。采用“盲法”分别于再灌注10min和再灌注24h对大鼠进行神经功能缺失评分；再灌注24h后处死大鼠， 脑切片TIE染色，数码相机照相，采用图像分析系统测量脑梗死体积比；根据统计结果评价改良的MCAO再灌注 模型，分析MCAO再灌注后神经功能缺失评分与脑梗死体积比之间的关系。结果 B组大鼠脑梗死体积比大于 A组(P0．01)；B组大鼠脑梗死体积比明显较A组稳定，变异系数(coefficient of variation，cv)分别为CVs=0．12， CVA=1．08)；再灌注10min和再灌注24h对大鼠进行神经功能缺失评分，B组评分均高于A组(P0．05)；MCAO 再灌注模型大鼠神经功能缺失评分与脑梗死体积比的大小成线性相关关系(r=0．873，P0．01)。结论 采用 改良的“梭头线栓”制作MCAO再灌注模型，神经功能缺失评分和脑梗死体积比变异度小、稳定性高，是可靠的制 模方法；神经功能缺失评分能反映脑梗死的严重程度，可用作评价药物疗效的指标。 关键词：线栓法；大脑中动脉阻塞再灌注模型；大鼠 中图分类号：R一332 文献标识码：A 急性脑梗死(acute cerebral infarction，ACI)的发病率、死 1．1．1 实验动物及分组 成年sD大鼠20只，雌性，体重 亡率、致残率均高，严重威胁着人类的身体健康和生活质量。 (280±10)g。大鼠随机分为A、B两组：A组普通“圆头线 对于急性脑梗死的实验研究，建立可重复性好，稳定可靠的 栓”组，Longa~5 法，B组改良“梭头线栓”组。 动物模型非常关键。为了解梗死的演变过程和药物疗效观 1．1．2 主要仪器、试剂和材料 手术显微镜、显微手术器 察，学者们发明了多种大脑中动脉局灶性脑缺血模型，有开 械、数码照相机、计算机图象分析系统、螺旋测微器、游标卡 颅机械闭塞法_l J、微栓子栓塞阻断法E2 、化学刺激诱导血栓 尺；氯化三苯基四氮唑(tripenylteazolium chloride，TYC)、 性闭塞法_3J、光化学诱导血栓形成法[ 、血管内栓线阻塞 Na2HPO4·12H20、NaH2PO4·2H20、氯化钠、多聚甲醛、肝素、 法_5J等。其中由K0izumi【6-73报道的采用颈内动脉插线的方 水合氯醛；溪流牌渔线、哥俩好牌万能胶。 法制成可实现再灌注的大脑中动脉阻塞模型，因其勿需开 1．2 方法 颅、创伤小、可实现再灌注和更接近人类急性脑梗死经药物 1．2．1“线栓”的制备 1)普通“圆头线栓”的制备 将直 溶栓后血管再通的病变过程，引起学者们的关注。Longa[ J 径为0．2mm渔线切成5cm长的线段，加热拉直，一端烧烤 等1989年报道，将线栓的头端烧成光滑的圆球对模型改进， 成圆球状膨大，手术显微镜下用螺旋测微器测量选取圆球 被广大学者采用。但模型制作中选用“线栓”的粗细以及“线 直径为0．3mm的线栓，并用记号笔在距膨大端0．8、1．8 cm 栓”头端的形状、大小等方面没有可靠的标准，导致模型制作 处做标记(图1，见封2)。75％酒精消毒后放入肝素化生理 中存在成功率、梗死体积等方面的差异而影响了实