生物制作技术考试复习题哈师大郭立波版.docVIP

生物制作技术 生物标本的作用和制作原则 ：概念 标本：指能够提供教学和科研以及观摩和展览用的经过加工和整理保持原形的生物和矿物等实物样品。 模型：指根据实物样品仿制而成的相似物品，是一种模拟本。 生物标本：经过加工保持原形和特征，供生物教学、科研及展览用的动物、植物、微生物的实验样品。 生物模型：指选用一些特殊材料仿制而成的生物模拟本。 ：作用：1、数据实物2、解决时间、空间问题 生物标本的制作原则 真实性 典型性 完整性 以科学性为主、艺术性为辅 把握生物学知识 熟悉制作材料化学性质 运用物理学知识 掌握信息托陈出新 ：玻片标本的制作 ：制作方法 切片法：1、徒手切片2、石蜡切片3、火棉胶切片4、冰冻切片5、超薄切片 非切片法：1、整体装片法2、涂片法3、压片法4、伸展法5、分离法6、磨片法 取材---固定---染色---脱水---透明---封固 ：玻片标本的制作过程 取材 制片计划：标本的采集，制作方法，药品的准备 注意事项：（1）选取新鲜、正常，具有代表性的部位 根据制片原则，选择和制备固定液（固定液的量是标本体积的20倍） 取材时要详细记录日期，地点，名称，年龄，性别，断面，固定液种类 2、固定和固定液: 迅速杀死细胞 物理方法：冷冻 化学方法：化学药剂 固定目的和作用： 防止自溶和腐败 使细胞内的蛋白质、糖类、脂类沉淀并保存下来，保持和生活时相思的状态，结构相似。 因为沉淀及凝固的关系，使细胞内不同成分产生不同的折光率，造成光学上的差异，易于辩解。 选择标准 一定能迅速杀死细胞，使细胞内成分凝固或沉淀。 渗透到组织内部的速度快，能够透入到组织和细胞的任何部分，使细胞内外迅速固定（完全）。 固定后组织和细胞不发生收缩和碰撞。 能增加细胞内部折光率，有助染色作用。 必须是最后的保存剂。 固定剂及其配制 简单：酒精——穿透能力强 70%酒精，缺点：易硬化，易收缩 醋酸——5% 极强的穿透力沉淀核蛋白，对染色质固定效果好，对细胞质蛋白缺少沉淀作用，材料不会硬化。 福尔马林——穿透力弱于醋酸和酒精，材料易膨胀，有利于细胞核染色，较适合动物组织。 苦味酸——穿透速度慢，饱和水溶液（把水稍微加热）沉淀细胞质，核蛋白，核酸，常用细胞固定剂。用70%酒精洗涤材料。 铬酸——0.5%-2% 沉淀一切蛋白质，对脂类，类脂类物质缺乏固定作用，是细胞质，细胞核的优良固定剂。 升汞——穿透能力强，仅次于醋酸，几年沉淀一切蛋白质，对脂肪物质缺乏固定，升汞的饱和溶液。 锇酸——1%浓度量，是脂肪，类脂类物质的唯一的固定剂，用于超薄切片的固定。 （2）混合固定剂：FAA固定剂——福尔马林5ml，50%或10%酒精90ml 5%醋酸5ml 用于植物固定，5-20小时 秦克氏固定液：重铬酸钾2.5g，升汞5g，硫酸钠1g，乙酸5ml，固定时间18-24小时动物细胞质，核的固定 蒸馏水-加热-倒入升汞-加重铬酸钾加硫酸钠-加乙酸调ph 肖丁氏固定液——升汞饱和液66ml，90%酒精33ml，乙酸1ml，固定时间6-8小时，对单细胞藻类原生动物，真菌有固定作用。用0.1-0.5%的碘酒洗涤，把汞洗掉 染色剂和染色法 来源分：天然的，合成的 用途分：细胞核染剂，细胞质染剂，脂质染剂 化学性质：酸，碱，中性 常用染剂介绍 苏木精：苏木红＋介质 成熟：苏木精经过氧化变成苏木红的过程 代氏苏木精：苏木精1g，95%乙醇25ml，铵明矾饱和水溶液40ml 甲醇100ml 曙红：适合动物，即可溶于水，也可溶于酒精 曙红0.5g 95%乙醇100ml或水100ml 95%乙醇25ml＋水75ml 番红：染细胞质和细胞核，染木质化，角质化 番红1g ＋70%乙醇100ml＋4ml苯胺油 或＋苯胺水90ml加95%乙醇10ml染色12小时以上 洋红：针对细胞核，1g洋红，70%酒精100ml 亮绿：植物组织的细胞质和纤维，可以染动物的软骨组织。 亮绿1g 蒸馏水100ml或亮绿0.5g 95%乙醇100ml 水100ml 苏丹三：脂肪，脂类物质，橙红色或橘红色。70%乙醇100ml苏丹三饱含量，染色时取上清液，染色15-20min 染色法：又批染色法，全面染色法，选择染色法 根据染剂使用多少：单染法，复染法，双重复染 操作方式：滴染法，浸染法 4、脱水剂和脱水作用： 脱水：用脱水剂将材料中的水分渐次完全脱去的过程。 脱水作用：1、使材料变硬，形状更加稳定 因为用作包埋封固的化学药品多是不能与水混合，所以必须去水才能完成包埋，封固，工作。 脱水剂：喜水性，与其他有机溶剂相融合。 常用脱水剂：酒精，丙酮，正丁醇，熟丁醇 透明作用和透明剂 透明剂：二甲苯，甲苯，苯，氯仿，冬青油 包埋：石蜡切片，超薄切片，材料太少，太小所以包埋。 常用包