嘌呤类似物治疗炎症性肠病的药理作用和临床应用.docVIP

嘌呤类似物治疗炎症性肠病的药理作用和临床应用 　　【中图分类号】R574 【文献标识码】B 【文章编号】2095-6851（2017）03-0-02 　　炎症性肠病（IBD）是一种慢性非特异性肠道炎症性疾病，病因尚不明确，包括溃疡性结肠炎（UC）和克罗恩病（CD）。其中硫唑嘌呤（AZA）为维持治疗和诱导缓解炎症性肠病的药物，1.5～2.5mg?kg-1?d?C1为常用剂量，是一种较常见的免疫制剂，可以实现减少患者激素的耐药性和依赖性[1]。由于个体差异，部分患者服用常规剂量的AZA后，临床症状并无缓解，甚至严重者出现毒副反应或骨髓移植以及肝脏毒性，因此限制了临床应用。 　　1.资料与方法 　　1.1 一般资料 　　选取确诊为炎症性肠病并拟接受嘌呤类似物治疗的患者15例，男性7例，女性8例，其中3例为溃疡性结肠炎患者，12例为克罗恩病患者。 　　溃疡性结肠炎的诊断：病程超过半年，伴有反复黏液脓血便，排除了细菌性菌痢、慢性血吸虫病、阿米巴痢疾、肠结核病等，且病变处明显可见弥漫性多发溃疡。 　　克罗恩病的诊断：病程超过半年，右下腹或脐周腹痛、腹泻并伴有肛瘘、腹部肿块、贫血、肛周病变等全身症状，排除肠结核、阿米巴痢疾等慢性肠道感染、缺血性肠炎、白塞病等，内镜下可见节段性病变、阿弗他溃疡等表现。 　　1.2 方法 　　1.2.1 6-TGNs浓度测定法 在酸性条件下，6-TGNs上的磷酸基团水解脱落成为6-TG，可作为定量TGNs浓度。 　　1.2.2 TPMT基因基因检测方法 采用基因扩增仪、高速离心机、焦磷酸测序仪等仪器进行人外周血基因组DNA提取。 　　2.结果 　　2.1 红细胞内6-TGNs浓度测定 　　采用色谱法进行相关测定，得出结果，得回归方程Y=0.0223X-0.0325，红细胞中6-TGNs浓度在7.87～787.40pmol范围内线性关系良好（r=0.9997）；RSD在0.46%～7.64%之间（日内、日间精密度），高、中、低质控液方法回收率在99.10%～102.07%之间，RSD在3.65%～6.71%之间（稳定性实验结果）。 　　2.2 TPMT基因检测 　　TPMT*3野生型为460位G90%，A10%，719位A%，G10%。杂合型突变位460位G，A碱基频率30%～70%；719位A，G碱基频率30%～70%，纯合子突变为460位G10%，A90%；719位A0%，G90%。基因检测序列和结果。 　　2.3 测定结果 　　15例患者在接受AZA治疗前进行TPMTA719G和G460A位点的检测。长期服用嘌呤类似物的炎症性肠病患者（每日剂量50mg、75mg、100mg），分别测定红细胞内6-TGNs的浓度，平均值位319.44pmol/（8*108）RBC。患者服用AZA首次检测结果，见表2。 　　所有患者在服用AZA之前或治疗过程中进行基因位点的检测，G460A位点可见基因型位GG、GA、AA，A719G位点可见基因型为AA、AG、GG，结果均为野生型，这个结果提示患者使用嘌呤类似物时发生骨髓毒副作用的风险较低。 　　3.讨论 　　炎症性肠病和自身免疫疾病及相关疾病的治疗可以应用非特异性的免疫抑制剂，例如6-巯基嘌呤和AZA等嘌呤类药物。嘌呤类似物为无活性的前体药物，需要经过体内代谢转变为6-TGNs后才能发挥疗效。临床上测定人红细胞中6-TGNs的浓度，大多通过6-TGNs在酸性条件下磷酸基团水解后生成6-TG后采用高效液相色谱法进行测定，这种测定方法专属性强并且简单快捷。 　　本研究采用的焦磷酸测序法适用于对已知的短序列的测序分析，来证明它适用于基因的多形态的分析，并且具有林敏度高、精确性好的特点，可以直观、快速、适时、低成本、高通量的进行单核苷酸多态性研究[2]。本研究检测了15例患者的红细胞6-TGNs浓度，对于部分患者的血?浓度进行了相应的剂量调整，结果表明，嘌呤类似物治疗炎症性肠病取得了较好的疗效，同时也可以预防产生的毒副作用。但本研究检测的15例患者的G460A和A719G基因序列，并未发现TPMT*3C的突变，因此今后需扩大病例数来进一步检测证实TPMT基因联合6-TGNs浓度检测对于临床治疗炎症性肠病的指导意义。 　　参考文献 　　[1]奎映仙.糖皮质激素及嘌呤类私物在炎症性肠病治疗中的应用与评价[J].中国社区医生，2016，32（2），18-20. 　　[2]万子睿，谢海棠，俞竞等.焦磷酸测序分析ABCG2基因多态性方法的建立[J].中国临床药理学与治疗学，2012，17（7）：779-784.