醋酸铅灌胃对小白鼠的毒性及牛奶的解毒作用研究.docVIP

醋酸铅对小白鼠的毒性及牛奶的解毒作用研究 广州市第十中学： 黄 婷 王慧婷 邓晓茵 陈绮侨 何晓欣 指导老师：廖立新 何晓英 摘 要 测定了醋酸铅灌胃对小白鼠生命活动的影响和牛奶的解毒作用。结果表明，醋酸铅溶液灌胃后的小白鼠出现明显中毒症状，表现为：聚堆、不活泼、腹泻、毛发疏松、嗜眼、死亡等。醋酸铅溶液灌胃后小白鼠食量和体重不同程度地下降。光镜观察，中毒小鼠血红细胞数量少，骨髓微核数量多，微核率高。牛奶灌胃没有改善上述指标，因此，牛奶的解毒效果不明显。 关键词：铅中毒、微核率、灌胃、醋酸铅 一、前言 随着工业的发展，工业生产排放的废气、废水、废渣造成环境中包括铅在内的重金属含量不断增加，引起人和禽畜急性中毒时有发生。在有色金属行业中，铅中毒是常见的职业病。因此，铅中毒引起了越来越多的人关注。牛奶是一种常见的饮料，网上很多地方都报道它有排铅解毒的作用。但是其作用究竟如何，它对急性铅中毒有无作用，在正式的刊物中未见报道。为此，我组通过醋酸铅灌胃诱发小白鼠急性铅中毒，研究了铅对小白鼠生命活动和体内骨髓细胞、血红细胞的影响，并用牛奶灌胃研究了牛奶的对铅中毒的解毒作用。 二 研究方法 1 实验材料 1.1 活泼健康昆明种小白鼠。 1.2 高钙高铁奶粉一包 1.3 药品及试剂：醋酸铅、蒸溜水、0.9%生理盐水、Giemsa染液、小牛血清、pH为6.8的磷酸盐缓冲液。 1.4 器材：双目显微镜、灌胃针、取血针、手术器械、血细胞计数板。 2 实验方法 2.1 从中山医科大学购买小白鼠70只，♀、♂各半。挑选健康活跃60只，随机分成 3大组。第一组为“对照组”（A组）；第二组为“染毒组”（B组）；第三组为“解毒组”（C组）。 2.2 每天中午用1%的醋酸铅溶液1ml对染毒组和解毒组小白鼠灌胃,对照组用蒸馏水1ml灌胃；下午用1ml牛奶（每15g奶粉溶于50ml纯水）对解毒组小白鼠进行灌胃，对照组和染毒组用1ml蒸馏水灌胃。每天观察并记录小白鼠生活情况，计算小白鼠每天的平均进食量。在实验前后给小白鼠称量体重，分析体重变化。7d后检测小白鼠的血铅，骨髓微核率及红细胞的数目。血样铅含量送往广州医学学院检测中心测定。 1.2.3 对小白鼠骨髓细胞的观察。取小白鼠双侧股骨，滴加1滴小牛血清，将骨髓挤出，清除骨渣，用推片在载玻片上研匀后推成一薄膜，晾干后在甲醇中固定10min，晾干后用Giemsa 应用液染色5min左右，以常水冲洗干净，在显微镜下选择细胞分散好、形态完整、染色良好的部位，按一定顺序进行计数。计数嗜多染红细胞（PCE为蓝灰色）及带微核的细胞（MNPCE）共600个，每只小白鼠计数微核的千分率。 2.4 白鼠红细胞数量计算[1] 眼眶静脉取血，0.9%生理盐水稀释200倍，放到血球计数板上用显微镜观察。记5个中格（左上、右上、中间、左下、右下）得出细胞总数，乘以10，000的到每mm3血液的RBC数目。 三、结果与分析 1 醋酸铅灌胃对小白鼠生存情况的影响 从表1结果可以看出，对照组生活正常，表现健康、活跃，无死亡现象；灌胃醋酸铅溶液的染毒组明显出现聚堆静卧、嗜眼、腹泻、毛发疏松、颤抖等急性中毒的症状，行走时呈拖步状态，行动缓慢，1周内有14只死亡。奶粉溶液灌胃解毒的解毒组“铅中毒”症状表现也明显，但死亡率比染毒组略低。 表1 醋酸铅灌胃对小白鼠影响 Table 1. The effect of stomach perfusion of lead acetate on kunming mouse. 组别 症状 A组 （对照组） B组 （染毒组） C组 （解毒组） 聚堆静卧 较少出现此现象 经常 经常 便秘 排便快速，粪便颜色正常 大部分小白鼠的粪便干燥，排便时间较长，少数粪便带黏液。粪便黑色 粪便干燥，排便时间较长。粪便黑色。 活跃 非常活跃 不活跃、反应迟钝 不活跃、反应迟钝 被毛疏松 其中3只出现此现象 其中13只出现此现象 其中9只出现此现象 颤抖 较少出现此现象 灌胃后，部分小白鼠出现 灌胃后部分出现 嗜眼 没有出现此情况 经常 较少出现 死亡 无死亡 第 2 天开始死亡，一周共有14只死亡 第2 天开始死亡，一周共有13只死亡 2醋酸铅灌胃对小白鼠食量的影响 对照组的平均食量呈上升趋势，醋酸铅灌胃后，小白鼠平均食量迅速下降，牛奶灌胃并未缓解食量的下降趋势(图1)。 3 醋酸铅灌胃对小白鼠体重的影响 醋酸铅灌胃7天后，小白鼠平均体重呈下降趋势，牛奶灌胃并未缓解体重的下降趋势，而对照组的平均体重呈上升趋势（图2）。 2.2.4 醋酸铅灌胃对小白鼠血红细胞数目的影响 醋酸铅灌胃后，红细胞的数目明显少于对照组，牛