6-O-羧甲基壳聚糖对人增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β1表达影响.docVIP

6-O-羧甲基壳聚糖对人增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β1表达影响[摘要]目的：观察不同浓度6-O-羧甲基壳聚糖（6-O-CMC）对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞（hypertrophic scar fibrob lasts，HSFBs ）转化生长因子-β1 (transforming growth factor-beta1，TGF-β1) 蛋白及mRNA表达的影响，在分子水平上探讨其抑制增生性瘢痕生长的作用机制。 方法：体外培养人HSFBs，选取第3～5代细胞进行下一步实验。实验分组采用含不同浓度6-O-CMC（0，100，200，400μg/ml）的DMEM培养液分别进行培养。培养24h后，显微镜下观察各组HSFBs形态及生长情况。收集细胞培养上清，运用双抗体夹心ELISA法检测各组TGF-β1蛋白表达水平。运用荧光定量RT-PCR技术检测各组TGF-β1 mRNA表达水平。 结果：与空白组相比，三个药物剂量组HSFBs TGF-β1蛋白及mRNA的表达均减少（P 1.3HSFBs的原代及传代培养：称取手术切除的增生性瘢痕组织块约5g，去除表皮及皮下脂肪，在无菌条件下漂洗、消毒，留白色质韧真皮胶原组织备用。原代培养采用组织块培养法，具体方法参照文献[5-6]进行，待细胞融合至80%时，常规消化、传代。实验选用第3～5代细胞。 1.46-O-CMC对H