二神丸及四神丸对脾虚泄泻大鼠分泌型IgA白介素-2含量影响配伍比较探究.doc

二神丸及四神丸对脾虚泄泻大鼠分泌型IgA白介素-2含量影响配伍比较探究摘要：目的：探讨二神丸、二神丸去姜枣和四神丸对脾虚泄泻作用机制的配伍组方差异性。方法：建立大黄致脾虚泄泻模型，设立空白组、模型组、参苓白术散、二神丸去姜枣、二神丸、四神丸和四神汤共7组。放免法检测大鼠十二指肠黏膜分泌型IgA(SIgA)、白介素-2(IL-2)的含量。结果：各给药组的SIgA、IL-2含量均较模型组升高。结论：二神丸、二神丸去姜枣、四神丸(汤)均能通过升高SIgA分泌量和IL-2含量，共同恢复细胞免疫和体液免疫功能而起作用，在升高脾虚泄泻大鼠白介素-2含量方面，四神汤最优，其次为二神丸组，二神丸去姜枣最差；在升高SIgA含量方面，二神丸最优，二神丸去姜枣最差。其作用效果之差异性可能与以下因素有关：(1)在升高IL-2含量方面，二神丸与五味子散配伍后体现了最佳的协同作用；肉豆蔻、补骨脂与生姜、大枣配伍后亦体现了较好的协同作用；但单独应用补骨脂、肉豆蔻协同作用并不显著。(2)在升高SIgA含量方面，肉豆蔻、补骨脂与生姜、大枣具有协同作用。(3)在提高机体免疫力，调节全身免疫机能方面，生姜和大枣有重要的配伍作用。 关键词：二神丸；四神丸；泄泻；分泌型IgA；白介素-2 中国分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2007)12-2437-03 四神丸始见于宋(成书于1254年)，明(成书于1253年)卷二载二神丸治脾肾虚弱，全不进食，由“生姜四两、大枣49枚、破骨脂炒香四两、肉豆蔻生二两”组成。泄泻是一种常见的慢性脾胃病证，临床上以脾虚泄泻为多见。四神丸临床用于治疗脾肾两虚之肾泄，亦称“五更泄”。其卓越疗效为临证首肯。但二神丸与四神丸对脾虚泄泻的作用机制配伍组方比较鲜有研究，本课题将从多层面对两方配伍进行系列研究，从而为临床用药提供一定的理论依据。现将初步研究撰文如下。 1.材料 1.1实验动物雄性Wistar大鼠56只，体重(240±30)g；昆明种雄性小鼠共两批(分别为56只和船只)，体重20～30g，均由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。 1.2试剂和药物 白介素-2放免试剂盒由北京福瑞生物工程公司提供；分泌型IgA免疫放射试剂测定盒，由北京华英生物技术研究所提供；四神丸：山西华康药业提供，批阳性对照药参苓白术散：华康药业提供，批号国药准大黄、补骨脂、肉豆蔻、吴茱萸、五味子均购于黑龙江中医药大学附属医院专科门诊；冰乙酸：天津市津东天正精细化学试剂厂。二神丸、二神丸去姜枣、四神汤以《内科摘要》的药物配比制成水煎液。 1.3仪器KDC-40低温离心机，科大创新股份有限公司中佳分公司；DY89－Ⅱ型电动玻璃匀浆机，宁波新芝生物科技股份有限公司；PL202-S/00型电子天平，梅特勒一托利多集团；HH－s恒温水浴锅，江苏医疗仪器厂；双佳ZFQ85A旋转蒸发器，上海医械专机厂。 2.实验设计 2.1实验动物分组和造模大鼠按体重随机分为7组即空白组、模型组、参苓白术散、二神丸去姜枣、二神丸、四神丸、四神汤，每组8只。模型组和各给药组按2.5mL/100g灌服大黄水煎液(100％)，空白组给予相同体积蒸馏水连续7天，大鼠出现便溏食少，毛色枯黄，体重减轻，静卧不喜动，视为造模成功。第8日各给药组按1.5mL/100g灌胃，浓度为参苓白术散(0.108g/mL)、二神丸去姜枣(O.18g/mL)、二神丸(1.08g/mL)、四神丸(0.108g/mL)、四神汤(1.2g/mL)，空白组灌服同体积蒸馏水，连续14天。 2.2指标检测末次给药后禁食24h，大鼠摘眼球取血1.5mL，室温放置20rain，4’E3500r/rain离心10rain，待测白介素－2。并将大鼠脱颈椎处死，打开腹腔取十二指肠下1cm处的肠组织，吸去血液，切取40mg，加入0.2mol/L的冰醋酸中作研碾磨，然后制成匀浆，4℃3000r/min离心15min，取上清待测SIgA。 2.3统计学处理所有数据通过SPSS11.0软件用t检验进行分析，用x±s表示。 3.结果 3.1二神丸　二神丸去姜枣和四神丸(汤)对脾虚泄泻大鼠分泌型SIgA的影响　见表1。 3.2二神丸　二神丸去姜枣和四神丸(汤)对脾虚泄泻大鼠血清白介素2的影响　见表２。 4.讨论 胃肠道免疫主要由黏膜相关淋巴组织、小肠黏膜上皮内淋巴细胞和SIgA三者共同协调完成。而黏膜相关淋巴组织所产生的SIgA抗体占80％以上。SIgA由消化道黏膜固有层的浆细胞产生，与上皮紧密结合在一起，分布在黏膜和浆膜表面，它不易被一般蛋白酶破坏，故成为机体抗感染、抗