人参皂甙对应激大鼠肝脏热休克蛋白70表达的影响.docVIP

　　人参皂甙对应激大鼠肝脏热休克蛋白70表达的影响 ：李宁 金法 吴可人 徐涛 裘华森 【摘要】 　　目的 研究人参皂甙对应激时肝脏热休克蛋白(HSP)70表达的影响，探讨其抗应激的作用机制。 方法 54只SD大鼠分为三组:干预组和模型组各24只，分别以人参皂甙溶液或生理盐水灌胃；对照组6只，予正常饮食。采用盲肠结扎穿孔法（cecum ligation and perforation，CLP）制作应激模型。分别于造模后6、12、24及72h检测大鼠肝细胞HSP 70的表达及血清IL-6水平的变化。结果 除12h外，干预组肝细胞HSP70的表达均＞对照组（P＜0.05）。干预组72h肝细胞HSP70表达＞模型组（P＜0.05）。干预组血清IL-6水平整体呈下降趋势，除6h外，各时点明显＜模型组（P＜0.05）。结论 人参皂甙可提高应激时大鼠肝细胞HSP70的表达，并可抑制IL-6的产生，减轻炎症反应，保护应激时的机体。 【关键词】 人参皂甙 应激 热休克蛋白70 白细胞介素6 　　【Abstract】Objective To study the effect and mechanism of panaxoside on the expression of liver heat-shock protein-70 in condition of stress. Methods 54 SD rats g/kg via gastric tube , stress model group （n=24）and normal control group（n=6）. Cecum ligature and perforation (CLP) method odel. The expression of HSP-70 and serum concentration of IL-6 al group at every time point except 12h, and in stress model group it is higher(plt;0.05) than in normal group at 72h after operation. IL-6 level odel group 12h、72h after CLP (plt;0.05). Conclusions Panaxoside can promote the expression of rat liver cell HSP-70 so as to protect body under stress and inhibit the production of IL-6 in some matory reaction. 　　【Key ed公司产品）。 　　1.3 实验方法 　　应激模型制备：大鼠模型制备前12h禁食不禁水，称重后用3%戊巴比妥腹腔注射（45mg/kg）麻醉，仰卧固定于手术台上，腹部脱毛消毒后，取下腹正中切口进腹，暴露盲肠后轻提出，用4号线环行结扎盲肠游离端1/3处（长约1.5 cm），注意避免损伤回盲部系膜血管，保持肠道畅通，用16号针头在结扎端贯通穿刺2次，挤出少量粪便，将肠管回纳入腹腔，用1号线单层连续缝合腹膜和皮肤，关腹，术后立即于双侧腹股沟皮下各注射1ml生理盐水，以补充术中液体丢失。动物分组及处理：将动物随机分为对照组（n=6）、模型组（n=24）及干预组（n=24）。干预组大鼠自由饮食，并以50mg/kg的0.5%人参皂甙溶液灌胃，1次/d；模型组以等量生理盐水灌胃 ；对照组自由饮食。喂养7d后模型组及干预组行CLP，术后继予灌胃，术后6、12、24、72h分批麻醉后处死，每个时间点6只（ 自然 死亡者抛弃），对照组在72h处死。均下腔静脉采血1.5ml测定IL-6含量，并切取肝脏，将肝脏标本置于10%福尔马林中固定、保存。血液标本分置于离心管中，分别标记，放入37℃水浴箱内水浴0.5h，红细胞等凝集沉积后，离心3000rpm、10min，吸取上清液，标记后置于-20℃冰箱内冷冻保存待测。 　　1.4 观测指标及检测方法 　　血清IL-6测定：酶联免疫吸附（ELISA）法测定，试剂购自博士德公司，严格按照试剂盒说明操作。免疫组化检测肝细胞HSP70的表达：Envision法免疫组化染色，光镜下观察HSP70的表达，结果用HPIAS-1000型高清晰度彩色病理图文报告分析系统在低倍镜下 计算 阳性面积百分比 (%)，每张切片随机选取5个视野，求平均值。 　　1.5 统计学方法 　　应用SPSS 13.0统计软件，实验数据以(x±s)表示，采用单因素方差分析处理，样本均数间两两比较用q检验（SNK法）。取双侧Plt;0.05为差异有统计学意义。