分子生物学第9章原核生物基因表达调控分析.ppt

教学要求 掌握操纵子的结构 理解诱导和阻抑操纵子的调控机制 理解葡萄糖对乳糖操纵子的调控方式 掌握色氨酸对操纵子的阻抑和弱化作用 第1节 基因表达调控的基本概念 二、基因表达的方式 组成性表达(constitutive expression) 适应性表达(adaptive expression） 1、组成性表达： 2、适应性表达 指环境的变化容易使其表达水平变动的一类基因表达。 应环境条件变化基因表达水平增高的现象称为诱导(induction)，这类基因被称为可诱导的基因(inducible gene)； 相反，随环境条件变化而基因表达水平降低的现象称为阻遏(repression)，相应的基因被称为可阻遏的基因(repressible gene)。 三、基因表达的规律 ——时间性和空间性 1、时间特异性（temporal specificity） 四、基因表达调控的生物学意义 适应环境、维持生长和增殖（原核、真核）  维持个体发育与分化（真核） 五、 基因表达调控的基本原理 (一) 基因表达的多级调控 基因表达调控可见于从基因激活到蛋白质生物合成的各个阶段，因此基因表达的调控可分为 转录水平（基因激活及转录起始） 转录后水平（加工及转运） 翻译水平 翻译后水平 但以转录水平的基因表达调控最重要。 （二）基因转录激活调节基本要素 1. 顺式作用元件 2. 反式作用因子 3. RNA聚合酶 操纵子 The operon model 操纵子模型 Jacob and Monod , 1961 获1965年诺贝尔生理学和医学奖 操纵子：是基因表达的协调单位，由调节基因、启动子、操纵基因及其所控制的一组功能上相关的结构基因所组成。 Structural genes(结构基因) ：用于表达参与特异生化合成途径所需的酶。 Control elements (调控元件)：调节结构基因转录的一段DNA序列，包括启动子、操纵基因等。 Regulator gene(s)(调节基因) ：编码合成那些参与基因表达调控的RNA和蛋白质的特异DNA序列。 2．反式作用因子（trans-acting factor） 定义：又称为分子间作用因子，指一些与基因表达调控有关的蛋白质因子。 反式作用因子与顺式作用元件之间的共同作用，才能够达到对特定基因进行调控的目的。 3. RNA聚合酶 1. 启动子碱基序列变化影响RNA聚合酶活性 （尤其－10区和－35区的共有碱基序列变化） 2. 调节蛋白构象变化影响RNA聚合酶活性 第2节 The Lac operon 乳糖操纵子 一、乳糖操纵子的结构 二、乳糖操纵子的调节机制 一、乳糖操纵子的结构 大肠肝菌能够利用乳糖： 环境中乳糖作为唯一碳源→ 表达并合成一系列与乳糖代谢相关的酶类 环境中没有乳糖 → 编码上述乳糖代谢酶的基因则被关闭 一、乳糖操纵子的结构 (一) 乳糖操纵子的结构 a regulatory gene (调节基因): Lac I, encode the lac repressor (编码乳糖阻抑物) 3 stuctural genes (结构基因): Lac Y、 Lac Z、 Lac A 2 control elements (调控元件): Plac（启动子)、 Olac(操纵基因位点) 位于 -5至＋21这段区域，和启动子的右侧末端重叠，26~28bp 是阻遏蛋白的结合位点。 (回文对称): 当一条链以5′到3′方向从左向右读与其互补链5′到3′方向从右向左读时具有相同的序列。 二、乳糖操纵子的调节机制 (一) 负调节机制 诱导物和结合于操纵基因上的阻遏物结合，使其从操纵基因上释放。而不是和游离阻遏物结合，影响阻遏物和DNA结合的平衡 诱导物改变阻遏蛋白在DNA上的分布，而不是产生游离阻遏蛋白： 随机DNA序列和阻遏蛋白也具有亲和力，但比操纵基因和阻遏蛋白的亲和力低107倍 诱导物和阻遏蛋白结合时，阻遏蛋白和操纵基因的亲和力下降，所有阻遏蛋白结合在DNA的随机序列上 除去诱导物后，阻遏蛋白恢复活性，从随机位点直接转移到操纵基因上 当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不能发挥作用 The Lac Operon:When Glucose Is Present But Not Lactose The Lac Operon:When Lactose Is Present But Not Glucose The Lac Operon:When Glucose and Lactose are Present The Lac Ope