分子细胞生物学——细胞内膜系统en.pptVIP

由于多肽链一端输入内质网时，其余部分正在合成，蛋白质不可能释放到细胞质基质，也不会折叠，因此不需要伴侣蛋白的帮助，也不需要ATP水解提供能量，可利用蛋白质合成的能量使多肽链穿膜转运。 所有这些蛋白质，不管以后命运如何，都以同样的分选信号和类似的机制穿入内质网膜。 ①信号肽(signal peptide) ②信号识别颗粒(signal recognition particle, SRP) ③停靠蛋白(docking protein) /SRP受体 ④转位复合物/ 移位器(translocator) ⑤停止转运序列(stop transfer sequence) ⑥信号肽酶(signal peptidase) 蛋白质共翻译转运涉及的成分 在成熟mRNA5’端起始密码之后，有一组编码特殊氨基酸序列的密码子，称为信号密码，由信号密码翻译出的肽链，叫做信号肽，也称起始转移序列。 信号肽一般含16~30个氨基酸残基，其N-端含1个或多个带正电荷的氨基酸，其后是6～12个连续的疏水残基。在蛋白质合成中将核糖体引导到内质网，进入内质网腔后通常被切除。 ①信号序列 内质网蛋白质在核糖体上合成时，首先合成N-末端信号肽，一旦信号肽从核糖体露出，即与信号识别颗粒(signal recognition particle简称SRP)结合，形成核糖体-信号肽-SRP复合体，并很快与位于内质网膜上的SRP受体结合，使核糖体附着到内质网膜上。 核糖体同内质网的结合受制于mRNA中特定的密码序列(翻译成信号肽)，具有信号肽的新生肽才能连同核糖体一起附着到内质网膜的特定部位，因此，核糖体同内质网的结合是功能性结合，具有功能性和暂时性，并受时间和空间的限制。 在蛋白质共翻译转运过程中，信号序列的N-端始终朝向内质网的外侧，插入蛋白质转运通道后与通道内的受体(信号序列结合位点)结合，其后的肽序列以袢环的形式通过运输通道。 信号肽的两个基本作用：①通过与SRP的识别和结合，引导核糖体与内质网结合； ②通过信号序列的疏水性，引导新生肽跨膜转运。 由于信号肽也是引导肽链进入内质网腔的一段序列，故又称起始转移序列(start transfer sequence)或起始转移信号(start-transfer signal) 。 ②信号识别颗粒 　　信号识别颗粒 (signal recognition partical，SRP) 是一种核糖核酸蛋白复合体，沉降系数为11S，含有分子量为72kDa、68kDa、54kDa、19kDa、14kDa及9kDa的6条多肽和一个7S(长约300个核苷酸)的scRNA。 SRP有三个功能部位：与核糖体结合的翻译暂停结构域(P9/P14)、信号肽识别结合位点(P54)、SRP受体结合位点(P68/P72)。 SRP能够识别刚从游离核糖体上合成出来的信号肽，并与之结合，暂时中止新生肽的合成，同时与内质网上的停靠蛋白结合，使核糖体附着到内质网膜上，并进行新生肽的转移。 SRP的信号肽结合位点是一个衬有甲硫氨酸的疏水大口袋，由于甲硫氨酸有一个易弯曲的侧链，使口袋有足够的可塑性以适应不同形状的疏水序列。 当SRP与核糖体和信号肽结合后，可引起蛋白质合成的暂停，使核糖体有足够时间在多肽链合成完成前结合到内质网膜上，以保证蛋白质不释放到细胞质基质中。 　　停靠蛋白(docking protein) 即SRP在内质网膜上的受体，是内质网膜的整合蛋白，异二聚体。 它能够与结合有信号序列的SRP (SRP-核糖体复合体)结合，引导正在合成蛋白质的核糖体停靠到内质网膜上的蛋白质转运子上。 一旦核糖体与蛋白质转运子结合，SRP即与SRP受体解离。 ③停靠蛋白(SRP受体) 在GTP结合和水解过程中，可引起SRP和SRP受体发生构型变化，从而导致两者解离。 SRP和SRP受体都是G蛋白，它们不仅将合成蛋白质的核糖体引导到内质网，而且通过GTP-GDP的交换，将内质网膜中的转位复合物(translocon)通道打开，让信号序列与之结合。 GTP 水解作为信号序列转运的能量来源。 转位器(translocon)也称转位子，为多亚基跨ER膜蛋白，由3-4个Sec 61蛋白组成，每个Sec 61蛋白又由3条肽链组成，最后装配成炸面圈样结构，中间有一个水溶性孔道。 当核糖体与转位器结合后，转位器的中央孔与核糖体大亚基的中央通道对齐，生长中的多肽链就