【绿色通道】高三生物一轮复习-专题5-新人教版选修1.docVIP

选修一 专题5 1．(2009年汕头)红细胞含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带氧气或二氧化碳，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题： (1)实验前取新鲜的血液，要切记在采血器中预先加入柠檬酸钠，取血回来马上进行离心，收集血红蛋白溶液。 ①加入柠檬酸钠的目的是________________________________________________________________________。 ②以上所述的过程即是样品处理，它包括________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________、收集血红蛋白溶液。 (2)收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析，这就是样品的粗分离。 ①透析的目的是________________________________________________________________________。 ②透析的原理是________________________________________________________________________。 (3)然后通过________法将样品进一步纯化，最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 ①样品纯化的目的是________________________________________________________________________。 ②血红蛋白有什么特点？________________________________________________________________________，这 一特点对进行蛋白质的分离有什么意义？________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析：蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。样品处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放和分离血红蛋白溶液；通过透析对血红蛋白溶液进行粗分离，透析的原理是透析袋能使小分子自由进出而大分子则保留在袋内，从而除去分子量较小的杂质；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，从而对样品进一步纯化，最后SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 答案：(1)①防止血液凝固　②红细胞的洗涤、血红蛋白的释放 (2)①去除分子质量较小的杂质　②透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内 (3)凝胶色谱　①通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去　②血红蛋白呈现红色　在凝胶色谱分离时，可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作。 2．凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离技术，由于设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果，目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛应用，不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。据图回答问题： (1)a、b均为蛋白质分子，其中先从层析柱中洗脱出来的是________，原因是________________________________________________。 (2)自己制作凝胶色谱柱时，在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由________替代。 (3)装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是____________________________________。 (4)若选用SephadexG-100，则“G”表示________________________________________________________________________ ________，100表示________。 (5)洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体________(填“相同”或“不同”)，洗脱时，对洗脱液的流速要求是____________________。 解析：(1)用凝胶色谱法分离各种大分子物质时，大分子物质先洗脱出来，然后是小分子物质。大分子物质由于直径较大，不易进入凝胶颗粒的微孔，而只能分布于颗粒之间，所以向下移动的速度较快。小分子