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河南省许昌市重点中学高三生物一轮复习-动物细胞工程导学案
第2讲 动物细胞工程
【重难点突破】
一、动物细胞培养
1、动物细胞培养
就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个的细胞,然后,在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
2、操作过程
(1)细胞来源是幼龄动物的组织、器官,其细胞的分化程度低,增殖能力强,有丝分裂旺盛,容易培养。
(2)将组织分散成单个细胞:物理方法—剪碎;化学方法是用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶处理。
(3)将分散的细胞和培养液组成细胞悬浮液,细胞生长时有接触抑制和贴壁生长现象。
(4)培养条件:
①无菌无毒环境:无菌——器具无菌处理,培养液加抗生素;无毒——定期更换培养液。
②营养:使用合成培养基时要加入血清、血浆等天然成分(含有促生长因子)
③温度和pH值:与被培养动物的体温相似,哺乳动物多数以36.5±0.5°C,多数pH为7.2~7.4。
④气体环境:95%氧气和5%二氧化碳。二氧化碳主要调节培养液的pH。
(5)原理:细胞增殖
(6)胰蛋白酶的作用除把组织分散成单个细胞外,还有将贴壁细胞从瓶壁上分离下来。
(7)培养结果:细胞株或者细胞系。细胞系的遗传物质发生改变。
(8)应用:生产细胞产品如干扰素、疫苗和单克隆抗体;检测并判定某种物质的毒性的大小。
【典题演示1】
1、(2010浙江卷)下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是( )
培养保留接触抵制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞
克隆培养法培养过程上多数细胞的基因型会发生改变
二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的
恶性细胞系的细胞可进行付代培养
【答案】D
【解析】考查了细胞工程的有关知识,动物细胞培养可以分为原代培养,原代培养到一定程度后要进行传代,因为细胞有接触抑制现象,当细胞接触时就会停止分裂(在细胞培养过程中进行的为有丝分裂,所以培养出来的多数细胞基因型相同),但是细胞在培养过程中,传代次数也是有限的,一般为50次就会死亡,留下来的细胞就是发生了癌变的细胞,遗传物质发生改变,具有不死性,但是仍保留接触抑制现象,所以还是要传代培养,这个也就是人体中癌细胞会转移的原因。
【变式训练1】
1、(2009浙江卷)用动、植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确的是
A.都需用CO2培养箱 B.都须用液体培养基
C.都要在无菌条件下进行 D.都可体现细胞的全能性
【答案】C
【解析】动、植物成体的体细胞进行离体培养都要在无菌条件下进行,动物成体的体细胞离体培养用液体培养基,不能体现细胞的全能性,植物成体的体细胞离体培养不一定用液体培养基,能体现细胞的全能性。
【变式训练2】、(2010苏北四市三模)下列关于细胞工程的叙述中,错误的是
A.植物细胞融合必须先制备原生质体
B.试管婴儿技术包括人工受精和胚胎移植两方面
C.动物细胞培养过程中要保持一定浓度的C02,其目的是促进动物细胞呼吸
D.用于培养的植物器官或组织属于外植体
【答案】C
【解析】掌握掌握细胞工程的基本方法和原理是关键。动物细胞培养的过程中药通过95%的氧气和5%的二氧化碳气体,二氧化碳的作用是维持培养液的酸碱度。
【变式训练3】、(2010泰州高三期末)下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是
A.培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体
B.培养中的人B细胞能够无限地增殖
C.人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株
D.用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞
【答案】D
【解析】动物细胞培养的基础是关键。单克隆抗体是有已经免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞产生的;B细胞不能无限增殖;人成熟的红细胞没有细胞核,不在具有分裂能力,所以是不会形成细胞株;有胰蛋白酶处理动物组织使细胞分散成单个。
二、动物细胞核移植技术与克隆动物
体细胞克隆是通过核移植实现的。一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个心胚胎最终发育为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。
(1)供体:提供细胞核。一般选择传代10代以内的细胞,能够保持正常的二倍体核型,保证了供体细胞的正常遗传基础。
(2)受体细胞:去掉细胞核的卵母细胞。选择减数Ⅱ中期的卵母细胞,此时具备受精能力,并且细胞质中含有与细胞分裂分化的物质能够刺激重组细胞进行分裂分化形成重组胚胎。选择卵母细胞作为受体的原因是细胞大,易于操作;卵黄度,营养丰富,为细胞发育提供充足的营养;激发重组细胞分裂分化。
(3)原理:动物细胞核的全能性。绝对不能说成动物细胞的全能性。
(4)技术手段:动物细胞培养、动物细胞融合、早期胚胎培养和胚胎移植。
(5)应用:加速家畜遗传改良、促进优良畜群的繁殖、保护濒危动物、克隆器官移植等。
(6)缺点
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