FOXO3a沉默或过表达对内皮祖细胞增殖的影响.PDF

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FOXO3a沉默或过表达对内皮祖细胞增殖的影响

中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2013, 35(1): 30–35 http ://www.cj FOXO3a沉默或过表达对内皮祖细胞增殖的影响 黄黎亚 王 飞 曹 青 刘 芳 桑甜甜 陈书艳* ( , 200092) 上海交通大学医学院附属新华医院老年医学科 上海 摘要 观察FOXO3a(forkhead box O3a)沉默或过表达对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)增殖的影响。构建了沉默型Ad-shRNA-FOXO3a和突变型Ad-TM(triple mutant)-FOXO3a 重组腺病毒载体。密度梯度离心法结合荧光激活细胞分选(fluorescence-activated cell sorting, FACS) 分离人脐血来源的EPCs(CD133+CD34+), 并进行体外培养及免疫荧光鉴定。将上述重组腺病毒载 体转染EPCs并观察转染效率与细胞形态学改变; Western blot分析FOXO3a蛋白表达变化; 细胞计数 MTT FOXO3a EPCs Ad-shRNA-FOXO3a Ad- 与 法分析 沉默或过表达对 增殖的影响。成功构建了 、 TM-FOXO3a 重组腺病毒载体并转染人脐血来源EPCs 。Western blot提示, Ad-shRNA-FOXO3a转 EPCs FOXO3a Ad-TM-FOXO3a EPCs FOXO3a 染 后明显抑制了 蛋白的表达; 转染 后明显增加了 蛋白 的表达。结合细胞形态学改变、细胞计数与MTT法实验结果提示, 有效沉默FOXO3a 明显促进了 EPCs FOXO3a EPCs EPCs FOXO3a 增殖; 过表达明显抑制了 增殖。人脐血来源的 中, 参与了细胞增殖 的调节。 关键词 FOXO3a; 基因沉默; 基因突变; 腺病毒载体; 内皮祖细胞; 细胞增殖 Effects of FOXO3a Silencing or Over-expression on the Proliferation of Endothelial Progenitor Cells Huang Liya, Wang Fei, Cao Qing, Liu Fang, Sang Tiantian, Chen Shuyan* (Department of Geriatrics, Xinhua Hospital, Shanghai Jiao Tong University School of Medcine, Shanghai 200092, China) Abstract To observe the effects of FOXO3a silencing or over-expression on the proliferation of en- dothelial progenitor cells (EPCs), the silent type Ad-shRNA-FOXO3a and the mutant

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