绿脓杆菌制剂对人肝癌MHCC97L细胞增殖和侵袭能力的影响.PDF

·455· ±堡墅望丛壁壅查垫!!堡!旦箜!!鲞箜!塑里堕i!』望!墼!!堕!i!!z墨!堡：』!!!!!!!!!!!：!!!塑竺：! ·实验研究 杆菌制剂对人肝癌MHCC97L 绿细 脓胞 增殖和侵袭能力的影响 周建炜 李涛 任正刚 刘彬彬 黄修燕 居昊杰 汤钊猷 【摘要】 vaccine，PA)对有转移潜能的人肝 目的探讨绿脓杆菌制剂(pseudomonasaeruginosa 癌MHCC97L细胞增殖和侵袭能力的影响。方法采用不同浓度的PA分别作用于MHCC97L细 胞。观察细胞增殖、生长曲线、克隆形成率、流式细胞术分析(FCM)、侵袭、运动、迁移、VEGF和 MMP2蛋白表达(ELISA法)。结果PA明显抑制MHCC97L细胞增殖和克隆形成，呈良好的剂量一 48 效应关系。PA h和72h的ICso分别为3．1×108／ml和1．9×108／ml。PA浓度为0．5×108／mi、 1×108／ml和2×108／ml时，其细胞倍增时间依次增加，克隆形成率依次降低(P均O．01)；FCM显 示，G。期细胞比例随PA浓度增加而增加，S+Gz期细胞比例随PA浓度增加而降低(P均0．01)。 PA浓度为1×108／ml时，穿过人工基底膜(侵袭实验)和上室底膜(运动实验)的细胞数(分别为4．8士 1．3和8．8士2．2)明显低于对照组(8．6士2．1和15．6士1．2)(P均0．01)；细胞经72h培养后，对照 组划痕逐渐愈合，1×108／ml的PA组细胞划痕依然明显。ELISA法检测发现，1×108／ml的PA组 其VEGF蛋白和MMP。蛋白含量和对照组相比均无明显差异(P均O．05)。结论在一定条件下， 绿脓杆菌制剂可抑制人肝癌MHCC97L细胞增殖和克隆形成，其作用部分是通过使细胞周期阻滞在 G，期实现的；绿脓杆菌制剂可以明显抑制MHCC97L细胞的侵袭、运动和迁移能力，其作用和 VEGF、MMPz蛋白分泌关系不明显。 【关键词】癌，肝细胞；绿脓杆菌制剂；细胞增殖；侵袭性；血管内皮生长因子；金属蛋白酶 EffectsofPseudomonasvaccineon andinvasivenessof carcinoma aeruginosa proliferation hepatocellular cell U Cancer j Min—jie，TANGZhao-you．’Liver Hospital，FudanUniversity， Institute，Zhongshan 200032．P．R．China Shanghai To theeffectsofPseudomonasvaccine(PA)on [Abstract]0bjectiveinvestigate aeruginosa andjnvasivenessofthe carcinomacellJineMHCC97Lwithmetastatic proliferation hepatocellular po— tential．Methods invasion Proliferation。growthcurve，plateefficiency，floweytometry，transwell test，vascularendothelialfactor(VEGF)andmatrix assay，cellmotilityassay，scarification growth