不同血清分型链球菌荚膜多糖的提取分离及结构组成初步分析.pdf

不同血清分型链球菌荚膜多糖 的提取分离与结构组成初步分析 摘 要 链球菌为兼性厌氧的革兰氏染色阳性菌，其可引起猪及人类的多种疾病。荚 膜多糖有抗吞噬活性，在猪链球菌致病过程中发挥重要作用，因此，不少学者正 努力探索预防这些疾病的途径，以荚膜多糖为基础的疫苗研制工作正在展开。本 文对l型、l／2型和14型猪链球菌荚膜多糖进行提取分离，通过多种提取和分离 技术及免疫检测手段，获得了成分较为均一的具有免疫活性的各型荚膜多糖组分 Tl、Tl／2和T14，然后对各个组分糖含量、蛋白含量、唾液酸含量、单糖组成、相 对分子质量等理化性质进行分析，并采用多种化学分析及现代仪器分析技术，初 步确定了1／2型和14型猪链球菌荚膜多糖化学结构。 采用不同酶解法和钙盐分步沉淀法依次对静置培养的1型、1／2型和14型猪 Fast 进行了初步的理化性质研究。对CPS卜CPSl／2和CPSl4分别采用QSepharose S-300凝胶渗透层析柱进一步纯化，其中得到 Flow离子交换层析柱和Sepharcryl kD、512．7 分别为262．5 kD和487．4kD，糖含量分别为29．3％、96．6％和53．5％， 9。经PMP 蛋白含量分别为3．1％、4．3％和O．5％，唾液酸含量之比分别为1：2．67：0．1 在对各型荚膜多糖组分基本理化性质进行研究的基础上，对组分Tl／2和T。4进行 红外光谱和核磁共振波谱分析，对其相应脱唾液酸后的产物DTI，2和DTl4进行核 磁共振波谱分析和气相质谱分析，通过多种化学分析方法和现代仪器分析技术对 荚膜多糖Tl，2和T14的结构进行了较为系统的研究。结果表明，Tl忍主要含有 量、蛋白含量、唾液酸含量、单糖组成、相对分子质量等理化性质进行了研究。 目前对猪链球菌荚膜多糖的研究主要集中在血清2型上，对其它具有致病性 的1型、1／2型和14型猪链球菌的研究并不多，特别是对其分离纯化和结构分析 方面的研究报道尚不多见。本文对1型、1／2型和14型猪链球菌荚膜多糖(Tl、 了初步研究，通过对1／2型和14型猪链球菌荚膜多糖的结构进行较为系统的研 究，可以为以荚膜多糖为基础的疫苗研制提供更多的线索和依据，进而推动未来 多价疫苗和结合疫苗的发展。 关键词：猪链球菌；荚膜多糖；提取；分离；结构分析 Extraction，isolation and structural prefiminary characterization ofdifferent serotypecapsular from suis polysaccharides Streptococcus Abstract suisisafacultativeanaerobic Streptococcus can Gram—positivebacteria，which causea of andhuman variety have