聂刘旺(第六章)原核基因表达调控(2012年).ppt

Chapter 6 原核生物的基因表达调控Regulation of Transcription in Prokaryotes 1、基因表达： 从DNA到蛋白质的过程称为基因表达 2、表达调控： 使表达过程有严格的程序性和精确性的过程称为表达调控 3、基因表达调控的主要层次： （1）转录水平的调控 启动子调控 终止子调控 （2）转录后的调控 mRNA的加工成熟 翻译水平调控 翻译后调控等 原核生物： Transcription often is controlled at the stage of initiation. Transcription is not usually controlled at elongation, but may be controlled at termination to prevent transcription from proceeding past a terminator to the gene(s) beyond. This is the primary control strategy for bacterial gene expression. 真核生物： In eukaryotic cells, processing of the RNA product may be regulated at the stages of DNA、 RNA、 Protein、modification, splicing, transport, or stability. 将在真核生物调控中介绍 调节型或适应型表达（Adaptive Expression) 基因表达明显地受环境的影响而改变。 二、原核生物基因表达调控总论 1、诱导调控和阻遏调控： 诱导调控：指蛋白质的合成对特定物质作出的反应调节称为～。 如：乳糖诱导作用 阻遏调控：若出现某种物质，细胞就关闭基因的表达，这种调节称为～。 如：色氨酸阻遏作用 2、正调控和负调控 正调控（positive regulation)： 负调控（negative regulation): 正调控和负调控是按照没有调节蛋白质存在的情况下，操纵子对于新加入的调节蛋白质的响应情况而定义的。 P: 232 3、原核生物基因调控的几种类型： 4、应急反应： 空载tRNA可引起焦磷酸转移酶激活，产生 ppGpp或pppGpp，从而激活细胞产生一系列的反应。 三、乳糖操纵子调控（Lac operon) 1、基本结构： 操纵子的定义 乳糖操纵子的结构 酶的诱导——lac体系受调控的证据 安慰诱导物： 如果某种物质能够促使细菌产生酶而本身又不被分解，这种物质被称为安慰诱导物，如IPTG（异丙基- β –D-硫代半乳糖苷）。 β- 半乳糖苷酶 乳糖 → 半乳糖 + 葡萄糖 诱导物： 异乳糖或 IPTG（异丙基-β- D – 硫代半乳糖苷） 底物： X – gal （5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷） β- 半乳糖苷酶可使该物质分解成两份，一个为半乳糖，一个为蓝色的分子 α －互补试验 许多载体都具有一段大肠杆菌β半乳糖苷酶的启动子及其α肽链的DNA序列，此结构称为lac Z′基因。Lac Z′基因编码的α肽链是β半乳糖苷酶的氨基端的短片段（146个氨基酸）。宿主和质粒编码的片段各自都不具有酶活性，但它们可以通过片段互补的机制形成具有功能活性的β半乳糖苷酶分子。 Lac Z′基因编码的α肽链与失去了正常氨基端的β半乳糖苷酶突变体互补，这种现象称为α互补。 由α互补而形成的有功能活性的β半乳糖苷酶，可以用X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷）显色出来，它能将无色的化合物X-gal切割成半乳糖和深蓝色的底物5-溴-4-靛蓝。 因此，任何携带着lac Z′基因的质粒载体转化了染色体基因组存在着此种β半乳糖苷酶突变的大肠杆菌细胞后，便会产生出有功能活性的β半乳糖苷酶，在IPTG（异