HIV_I编码病毒蛋白R基因在真_省略_白对KSHV溶解性周期复制的影响_方欣.pdfVIP

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2017-08-24 发布于湖北
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HIV_I编码病毒蛋白R基因在真_省略_白对KSHV溶解性周期复制的影响_方欣

第卷第期南京医科大学学报(自然科学版) 28 9 年月 ( ) 2008 9 ACTAUNIVERSITATISMEDICINALISNANJINGNaturalScience · · 1089 HIV-I编码病毒蛋白R基因在真核细胞中的表达及其表达蛋白对 KSHV溶解性周期复制的影响 * 方欣,卢春 ,曹戌,李久明,秦娣,吕志刚 (南京医科大学微生物学与免疫学系,江苏南京 ) 210029 [摘要] 目的:构建含人类免疫缺陷病毒型( )编码病毒蛋白 ( )基因的重组真核表达质粒并初步探索基因 1 HIV-1 RVpr Vpr 编码蛋白对卡波济肉瘤相关疱疹病毒( )溶解性周期复制的影响。方法:构建重组质粒并进行酶切鉴定和序列 KSHV pVpr-Flag 测定;将重组质粒临时转染和细胞,采用、和分别从和蛋白水平检 pVpr-Flag BCBL-1 NIH3T3 RT-PCRIFA Westernblot mRNA 测Vpr基因的表达情况;提取临时转染pVpr-Flag重组质粒的BCBL-1细胞总RNA,进行RT-PCR检测KSHV次要衣壳蛋白编码基因 (仅在病毒裂解期表达) 转录水平,初步探索基因编码蛋白对复制的影响。结果:克隆的 ORF26 mRNA HIV-1Vpr KSHV Vpr 基因序列与中已登记的序列同源。、和结果显示基因及其编码蛋白在 GenBank Vpr 100% RT-PCRIFA Westernblot Vpr mRNA 真核细胞中得到了转录和表达。结果进一步显示, 基因编码蛋白能够降低转录水平。结论:成 RT-PCR Vpr KSHVORF26mRNA 功构建含Vpr基因序列的重组质粒并在真核细胞中获得正确表达;初步探索表明Vpr蛋白能够抑制KSHV溶解性周期复制。 [关键词] 人类免疫缺陷病毒型;病毒蛋白 ;卡波济肉瘤相关疱疹病毒;真核表达;复制 1 R [中图分类号] [文献标识码] [文章编号] ( ) R392.11 A 1007-4368200809-1089-06 TheeukaryoticexpressionofHIV-1encodedviralproteinregulatorygeneanditseffecton thelyticcyclereplicationofKSHV * , , , , , FANGXinLUCh