ISPM27号标准限定有害生物诊断规程DP7：马铃薯纺锤形块茎类病毒.PDF

本诊断规程于2015 年 1 月由标准委代表植检委通过。 本附件是ISPM 27 号标准规定的一部分。 ISPM 27 号标准 限定有害生物诊断规程 DP 7 ：马铃薯纺锤形块茎类病毒 （spindle tuber viroid ） 2016 年通过；2016 年出版 目录 1. 有害生物信息 2 2. 分类信息 3 3. 检测 3 3.1 抽样 6 3.2 生物学检测 6 3.3 分子检测 7 3.3.1 样品制备 7 3.3.2 核酸提取 8 3.3.3 马铃薯纺锤形块茎类病毒属的通用分子检测方法 10 R 10 用DIG 标记的cRNA 探针杂交 10 使用Verhoeven 等（2004 ）引物的常规RT-PCR 11 使用GenPospi 检测的实时RT-PCR （Botermans 等，2013 ） 12 3.3.4 具有较高特异性的PSTVd 分子检测方法 14 使用Shamloul 等（1997）引物的常规RT-PCR 14 使用Boonham 等（2004 ）引物的实时RT-PCR 14 实时RT-PCR （Plant Print Diagnòstics kit ） 15 3.4 分子检测的对照 16 3.5 常规和实时RT-PCR 结果的解释 18 3.5.1 常规RT-PCR 18 3.5.2 实时RT-PCR 18 4. 鉴定 18 4.1 测序与序列分析 19 5. 记录 20 6. 获取进一步信息的联系点 20 7. 致谢 21 8. 参考文献 21 《国际植物保护公约》 DP 7-1 DP 7 限定有害生物诊断规程 1. 有害生物信息 类病毒是没有蛋白质外壳，共价闭合的单链环状 RNA 分子，长度为 239 －401 个碱基对，由寄主酶复制（Hammond Owens ，2006 ）。马铃薯纺锤形块茎类病毒 （PSTVd ；马铃薯纺锤形块茎类病毒属（Pospiviroid ））通常长359 个碱基对，但有 报道称有的 PSTVd 分离物含有 341 －364 个碱基对 （Wassenegger 等，1994； Shamloul 等，1997；Jeffries ，1998）。根据易感病的番茄品种产生的症状，例如番 茄（Solanum lycopersicum L. ）的卢特格 （Rutgers ）品种（Fernow ，1967），人们对 其弱系和强系进行了描述。 PSTVd 的自然寄主范围相对较窄。主要的自然寄主是产生匍匐茎和块茎的茄属 植物；例如马铃薯（Solanum tuberosumL. ）和番茄（S. lycopersicum ）。PSTVd 在辣 椒（Capsicum annuum ）、鳄梨（Persea americana ）和香瓜茄（S. muricatum ）中也 有发现。PSTVd 主要在无性繁殖的茄科观赏植物种类中发现－即木曼陀罗属 （Brugmansia