RNAi治疗大时代.docVIP

RNAi治疗大时代 RNA干扰(RNA interference，RNAi)是一 种基因转录后沉默机制，在自然界就存在这种 机制。16年前，科学家们开始关注这种机制用 于治疗的潜力，尤其是对一些常规药物无能为 力的疾病，比如癌症。但是，十多年来，RNAi 治疗手段通往临床应用的路途却如过山车一般 充满波折。 Andrew Fire与Craig Mello于1998年在线虫中 首次揭示了RNAi现象，二人在2006年凭借这 项重要发现荣获诺贝尔生理及医学奖。此后， RNAi凭借其简单的操作方法及优秀的实验效果 很快成为基础科研的主要技术，全世界研究者 都开始使用这种方法在细胞与动物模型中沉默 特定基因。 同时，越来越多的科学家开始对RNAi治疗 产生浓厚兴趣。 更高，且不需要特殊的结合蛋白，可以直接作 用于单克隆抗体无法到达的靶点，直接阻止某 些基因翻译产生致病蛋白，在源头阻断疾病发 生，从而避免使用小分子药物或其他生物制剂 在分子级联通路下游治疗疾病。 尽管RNAi治疗有种种优势，仍然有学者对 RNAi治疗持谨慎态度。 制药企业开始在此领域疯狂烧钱，以求抢占技 术制高点。 理性繁荣”阶段。数家大型制药公司在并未考 虑其技术障碍的情况下相继投入数十亿美元， 开始将一些已有的技术研发转向RNAi治疗，尤 其是那些遗传靶点确凿，但没有药物的疾病。 然而，早期临床实验结果却令人十分失望 ，RNAi治疗并没有达到人们预期的效果。 最引人注目的是，2009年，迈阿密制药公司O PKO所开发的湿性黄斑变性RNAi疗法，由于效 果欠佳而不得不在临床III期实验时被放弃。其 他基于RNAi设计的药物要么药效不好，要么会 产生严重的自身免疫反应，均未成功通过临床 实验。 RNAi疗法开始进入一个“怀疑和绝望”阶段 。之前疯狂烧钱的制药巨头们面对整个行业的 动荡，开始砍掉RNAi项目。 NAi技术研发中投入了将近5亿美元的罗氏制药 终止了RNAi的内部研发。 雅培退出RNAi治疗领域，默克也关闭了他们在 2006年耗资11亿美元从Sirna Therapeutics公 司得到的RNAi实验室。 不过，之后数年内，随着RNAi在靶点特异 性及释放技术上的不断改进，RNAi疗法的过山 车之旅在到达谷底后开始了强力爬升。在初期 临床实验中，RNAi疗法取得了越来越多的成功 ，有很多专家已经开始期待在今后几年内RNAi 能从FDA取得更大的突破。 RNAi在哺乳动物中已经有了很多研究。 种由70个bp左右的双链RNA序列构成的短发夹 RNA(short hairpin RNAs，shRNA)被导入到胞 质内，Dicer酶将它们切割成21个bp左右的siR NA。siRNA的反义链进一步形成RNA沉默复合 体(RNA-induced silencing complex，RISC)， 该复合体可以结合到和其配对的mRNA上并引 导mRNA被降解，从而阻止蛋白翻译。在自然 过程中，RNAi是基因组抵御入侵者的一个主要 手段。而作为治疗手段，RNAi则具有清除致病 蛋白的作用。 更关键的是，这种现象在哺乳动物中是高 度保守的。科学家已经对许多物种进行了研究 ，它们都可以利用siRNA实现稳定而持续的RN Ai效应。很多科学家相信，RNAi可以很快在人 体中实现相同的效果。 在初期实验中，研究者将未被修饰过的si RNA直接注射进入眼睛与其他器官中，siRNA 直接释放进入血液，会被酶降解，且无法穿过 细胞膜。将siRNA包裹进脂质纳米粒(lipid nan oparticles，LNP)中，可以把siRNA从血液输 送到疾病细胞内。 动物模型中实验时，科学家发现这些颗粒大多 数进入了肝脏。肝脏内血管高度密集，内皮细 胞上充满了直径约100nm的小孔，足够直径70 到80nm的LNP在运输途中经过肝脏时进入肝 细胞。而且，一旦LNP进入血液，它们会很快 被载脂蛋白E覆盖，该蛋白会和肝细胞上的受 体结合，让LNP更容易进入细胞。 许多有前景的肝脏RNAi药物都是利用这些 机制设计的。制药公司Alnylam已经在临床领 域开发了15种RNAi治疗手段。其中，最先进 的是LNP类siRNA药物patisiran(ALN-TTR02) ，这种药物用于甲状腺素运载蛋白(transthyret in，TTR)相关淀粉样变性，这种肝脏疾病会引 起心衰，目前没有好的治疗手段。今年4月， 该公司报道了此药物临床II期实验结果，效果 明显，同时表明TTR蛋白是这种疾病的主要诱 另一个LNP类siRNA药物ALN-PCS02可以 降低一种名为PCSK9(proprotein convertase s ubtilisin/kexin type 9)的酶表达量，达到治疗 遗传性高胆固醇的目的