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益气化瘀方对大鼠前列腺增生组织
益气化瘀方对大鼠前列腺增生组织(杭州市红十字会医院,浙江 杭州 310003)
摘 要:目的:观察益气化瘀方对大鼠前列腺增生组织血管新生和基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制物(TIMP-2)表达的影响。方法:50只SD大鼠去势7天后,皮下注射丙酸睾酮 5mgkg-1?d-1,同时给予益气化瘀方、非那雄胺混悬液灌胃,30天后股动脉放血处死大鼠,摘取前列腺,测量前列腺体积,计算前列腺指数(PI),检测前列腺微血管密度(MVD)和前列腺组织中MMP-2及其抑制物(TIMP-2)表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠前列腺指数明显增大(P<0.01),前列腺组织MVD明显增高(P<0.01),MMP-2蛋白表达显著增高(P<0.01),MMP-2/ TIMP-2比值明显增大(P<0.05);各给药组前列腺前列腺指数、MVD、MMP-2表达、MMP-2/ TIMP-2比值均明显低于模型组(P<0.05或P<0.01);益气化瘀方中、高剂量组大鼠前列腺指数、MMP-2表达量、MMP-2/ TIMP-2比值与非那雄胺组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但前列腺组织MVD明显低于非那雄胺组(P<0.05)。结论:中药益气化瘀方具有抗前列腺组织增生作用,其机制可能与抑制MMP-2过度表达,进而抑制前列腺增生组织新生血管形成有关。
关键词:良性前列腺增生;大 鼠;血管新生;MMP-2;TIMP-2;益气化瘀方
中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:1673-7717(2011)03-0500-03
Effects of Yiqi Huayu Chinese Medicine on the Expression of MMP-2/TIMP-2 in BPH Rats
YANG Xin, DING Cai-fei,YAN Zhi-zhong,NI Wei-dong
(The Red Cross Hospital of Hangzhou,Hangzhou 310003,Zhejiang,China)
Abstract:Objective:To study the effects of Yiqi Huayu chinese medicine on renew of new vessels and MMP-2 and TIMP-2.expression in BPH rats. Methods:Castrated 7 days later, Fifty SD rats were injected with testosterone(5mgkg-1?d-1) ,the decotion of Yiqi Huayu and finasteride suspension were orally administrated respectively, after 30 days’ treatment, the rats were sacrificed, the prostate volume were measured, and the prostate index(PI) were analyzed, the microvessels density(MVD) and level of MMP-2 and TIMP-2 were measured. Results:The levels of PI, MVD, MMP-2, and the ratio of MMP-2 /TIMP-2 of model group were obviously higher than the control group(P
1.3 试剂及仪器
兔抗人MMP-2多克隆抗体(克隆号ZA-0331),兔抗人TIMP-2多克隆抗体(克隆号:BRA-0283),即用型鼠抗人CD34单克隆抗体试剂盒(克隆号:QBEnd/10),PBS、DAB显色试剂盒均购自福州迈新生物技术有限公司;光学显微镜(OLYMPUS-CHC,日本),石蜡切片机(SLEE-CUT-4060,德国),全自动真色彩图像分析系统(LEICA Q 550IW PMLB,德国)。
2 实验方法
2.1 分组与造模
动物购入后适应性饲养1周,经观察无异常后编号称重,按体重层次随机分为正常组,模型组,非那雄胺组和益气化瘀方低、中、高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组参照《西药新药临床前研究指导原则汇编》[3]进行造模。戊巴比妥钠40 mgkg-1腹腔注射麻醉后,无菌条件下经阴囊摘除双侧睾丸,结扎残端以确保止血,缝合皮肤,肌肉注射青霉素20万U/只,恢复1周。从去势后第8天起,每只大鼠腹部皮下注射丙酸睾酮5mgkg-
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