肾气虚模型大鼠肾脏AQP2mRNA表达探究.docVIP

肾气虚模型大鼠肾脏AQP2mRNA表达探究摘 要：目的：观察肾气虚模型大鼠肾脏水通道蛋白2(AQP2)表达的情况。方法：将SD大鼠20只随机分为模型组和对照组，用RT-PCR方法检测肾脏AQP2mRNA的表达。结果：肾气虚模型大鼠肾脏AQP2mRNA的表达较对照组减少(P0.01)。结论：肾气虚模型大鼠肾脏AQP2mRNA的表达减少，从而导致肾脏AQP2表达减少，引起尿量增多。本实验为中医学“肾主水”理论提供了实验依据。 关键词：肾气虚；水通道蛋白2 中图分类号：R-33 文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2008)03-0567-02 the Research of Kidney Aquaporin-2mRNA Expression in Kidney-Qi Deficiency Model Rats TAI Shi-Chun，WANG Zhe，SUN Da-Yu，WANG De-shan (Liaoning University of TCM，Shenyang 110032，Liaoning，China) Abstract：Objective：To observe the effects of kidney aquaporin-2 expression in kidney-Qi deficiency model rats. Method：Twenty healthy SD rats were divided into the model group and the control group at radom. The method of RT-PCR was used to observe the expression of aquaporin-2 in kidney.Results：kidney AQP2mRNA expression in the kidney-Qi deficiency model rats is decreased to compare with the control group (P 0.01). Conclusion：kidney-Qi deficiency model rats kidney AQP2mRNA expression is reduced，thus causes the kidney AQP2 expression to reduce，causes the urine quntantity to increase. This experiment has provided the experimental basis for the theory of “the kidney host water” of the traditional Chinese medicine. Keywords：kidney -Qi deficiency；aquaporin-2 水通道蛋白(aquaporins，water channels，AQPs)是多种组织细胞膜上存在的转运水的特异性孔道。它们的发现在分子水平上揭示了水跨膜转运调节的基本机制。在哺乳动物，目前已发现13种具组织特异性分布的AQPs[1]，其中AQP2、AQP3、AQP4等在肾脏的表达与尿的浓缩和稀释过程有密切关系，并在某些肾脏疾病及病理过程的发生中起了关键作用。中医学理论认为“肾主水”，肾在维持体内水液代谢的平衡中发挥重要的作用。关于肾气虚模型大鼠肾AQP2的变化及其调节机制尚无报道。本研究利用分子生物学手段研究了肾气虚模型大鼠肾AQP2mRNA的表达变化。 1 材料和方法 1.1 实验动物 1.1.1实验分组取健康SD大鼠20只(辽宁中医药大学实验动物中心提供)，雌雄不拘，体重(250±20)g，随机分为2组：正常对照组(a组)；肾气虚模型组(b组)，每组10只。 1.1.2 模型建立按文献方法[2]制作“肾气虚”大鼠模型。造模方法：模型组：腹腔注射卡那霉素，用药量250mg/kg体重，分2次注射，用药14天。自由进食、水。对照组：用等量0.9%氯化钠注射液代替卡那霉素腹腔注射。自由进食、水。 1.2 实验方法 1.2.1 尿量 尿比重测定 取大鼠代谢笼在动物造模第14天开始留取大鼠24h尿液，用量筒测量24h尿量；采用折射计法测定尿比重。开通光路后，用蒸馏水调整基准线位置。测量标本时，滴加尿液1滴，盖上塑料盖(防止产生气泡)，即可在目镜中读出相应的数，为渗透压，然后按比重、渗透压对照表读出相应的比重值。 1.2.2 逆转录-聚合酶链式反应(RT―PCR) 肾组织总RNA的提取按照TRIzol RNA抽提试剂盒(