豆天蛾中氨基酸成分提取及含量测定.docVIP

豆天蛾中氨基酸成分提取及含量测定[摘要] 目的 研究豆天蛾酸水解提取氨基酸的提取工艺,及其氨基酸的种类和含量。方法 通过正交试验以总氨基酸的含量为指标,确定合理的酸水解工艺,采有HPLC柱前衍生法测定各氨基酸的含量。结果 酸水解的最佳工艺为:酸浓度为10N,加酸水量3倍,温度为140℃,水解3h,氨基酸的得率最高,为689.05mg/g。水解液中有17种氨基酸,氨基酸的含量为630.15mg/g,其中谷氨酸含量最高,为83.809mg/g。 [关键词] 豆天蛾;氨基酸;酸水解;HPLC [中图分类号] R285.5 [文献标识码] A[文章编号] Study on Amino acid compounds and acid-catalysed hydrolyses of Clanis bilineata tsingtauica ZHAN Yong-Cheng, LIU Tao, LI lu (1 Department of Chemical Engineering, Huaihai Institute of Technolngy, Lianyungang 222005, 2Jiangsi Kanion Pharmaceutical Co. Lid., Lianyungang 222001) [Abstract]To study the acid-catalysed hydrolytic method and the contents of amino acids in Clanis bilineata tsingtauica, the acid-catalysed hydrolyses was performed by the orthogonal experiment. The results showed that the optimal conditions were as follows: acid 10N, ratio of stuff to solvent 1:3, temperature 140℃, and hydrolytic time 3h. Under the optimal conditions, the extraction rate of amino acids as 68.9%. The technology of precolum derivatization, along with high performance liquid chromatography gradient elution was used in determining the contents of amino acids. The results showed more than 17 amina acids in it . [Key words]Clanis bilineata tsingtauica, amino acid, acid-catalysed hydrolyses, HPLC 豆天蛾(Clanis bilineata tsingtauica)为天蛾科豆天属昆虫,俗称“豆丹”、“豆参”,是连云港地区最具代表性的地方特色产品之一,被誉为“国内少有,苏北仅有,灌云特有”的美味珍品[1]。在医药上,豆丹具有降血压、降血脂作用,对高血压、冠心疾和肠胃病等有独特的疗效。吴胜军[1]等对豆天蛾的营养成分进行了初步的研究,前文报道了豆天娥中油脂的提取及其脂肪酸的组成[2],本文研究了酸水解法提取氨基酸的工艺,和采用柱前衍生HPLC法测定了氨基酸的种类和含量。 1仪器与试剂 高效液相色谱仪(Waters公司,Waters 600泵系统,2996PDA检测器,717自动进样器);混合氨基酸标准液(含17种氨基酸,Waters公司提供);6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC,衍生试剂,Waters公司);流动相A,醋酸盐-磷酸盐缓冲液(Waters公司);乙腈(色谱纯),DF-1集热式磁力搅拌器(金坛市荣华仪器公司),液体石蜡,硫酸,氢氧化钠,百里酚酞,锌粉,乙醇,甲醛。 2 方法与结果 2.1蛋白质酸水解工艺的考察 2.1.1考察因素和水平:选择了料液比,水解酸浓度,水解时间,水解温度等4个因互素,每个因素选择3个水平,编制因素水平表(1)。 2.1.2试验与结果:称取干燥至恒重的豆天蛾粉末100g,加入石油醚(30-60℃)约500ml,加热回流脱脂90min,过滤得药渣,挥干石油醚,称量脱脂后的粉末7.7g,按L9(34)正交表设计方案进行试验,以氨基酸总量为指标进行分析,结果见表(2) 总氨基酸的含量测定(甲醛滴