重组人锰超氧化物歧化酶纯化条件探究.docVIP

重组人锰超氧化物歧化酶纯化条件探究摘要：目的研究重组人锰超氧化物歧化酶（rhMn－SOD）的纯化条件。方法超声法破碎细胞，用热变性方法沉淀蛋白质；优化DEAE离子交换层析的的分离条件，并用葡聚糖凝胶G100分子筛分离纯化蛋白质。结果菌体破碎最佳超声功率为300W，超声70个循环，粗酶液热处理最佳温度为75 ℃，时间10 min；DEAE上样缓冲液最佳pH值为9.0，洗脱液NaCl含量为0.1 mol/L ， G100纯化后，rhMn-SOD比活达到4 411.706 U/mg，纯化倍数是粗酶液的5倍。结论得到了适于分离纯化rhMn-SOD的较简便的工艺。 关键词：重组人锰超氧化物歧化酶；大肠杆菌；离子交换层析 中图分类号：Q554文献标识码：A文章编号：1672-979X(2007)07-0001-05 Study on Purification Condition of Recombinant Human Manganese Superoxide Dismutase CHENG Yi1,CHEN Che-sheng2, WU Qian-yi2, ZHAO Jian1*,YUAN Qin-sheng1 (1. State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of