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麻杏石甘汤对急性放射性肺炎大鼠IL-6及PDGF水平影响
麻杏石甘汤对急性放射性肺炎大鼠IL-6及PDGF水平影响摘要:目的:观察麻杏石甘汤对急性放射性肺炎大鼠血浆及肺组织细胞中IL-6与PDGF水平的影响。方法:复制SD大鼠放射性肺炎模型,以麻杏石甘汤高、中、低剂量灌胃。于第2、4、8周分别采用ELISA、免疫组化法测试大鼠血浆及肺组织IL-6、PDGF的水平。结果:与模型组比较,麻杏石甘汤能下调急性放射性肺炎大鼠血浆及肺组织细胞中IL-6、PDGF浓度。结论:麻杏石甘汤对放射性肺炎急性期大鼠有一定的改善作用。
关键词:麻杏石甘汤 急性放射性肺炎 IL-6 PDGF 大鼠
放射治疗是恶性肿瘤重要的治疗手段之一。统计数据显示,肺癌、乳腺癌、食道癌等胸部肿瘤约70%~90%需要接受放射治疗。当肺组织接受较高剂量和/或较大容积的照射,或患者对放射线敏感时,可能发生放射性肺炎。有症状的放射性肺炎的发病率为5%~15%,目前有上升趋势。近年来研究表明,放射性肺炎的炎性改变是一个由局部组织直接或间接产生细胞因子而导致的病理过程。笔者通过实验研究,观察麻杏石甘汤对放疗后肺损伤大鼠血浆及肺组织中白介素6(IL-6)、血小板衍生因子(PDGF)表达水平的影响,以期从分子层面上证实麻杏石甘汤对急性放射性肺炎的治疗作用。
1、材料与方法
1.1实验动物:健康SD大鼠50只,雄性,体重220±20g。
1.2主要药品和试剂:麻杏石甘汤按正常人体(65kg)的每日剂量,将麻黄、杏仁、甘草、石膏浸泡,分别煎3次,合并煎液,过滤备用。主要试剂:大鼠IL-6 ELISA试剂盒,编号:3R035;大鼠PDGF ELISA试剂盒,编号:3R120;兔抗大鼠IL-6多克隆抗体(1:50),博士德公司;兔抗大鼠PDGF多克隆抗体(1:50),博士德公司。以上试剂均放置4℃保存。
1.3动物造模制备:大鼠在未麻醉状态下,腹部朝上,四肢及头部用细绳固定于木架上,排列整齐,尽量使大鼠的肺部均位于一直线上,10只大鼠一架。用模拟定位机校准大鼠双肺位置,用西门子PRIMUSM加速器进行单次全胸照射大鼠双肺,用多叶光栅屏蔽保护大鼠其余部分。照距SSD为120cm,其剂量约为200cGY/min,连续照射10min,总剂量20GY。
1.4分组与给药:将50只雄性SD大鼠随机分为5组,每组各10只。受试前笼养3天以适应环境,第4天随机选取1组做为阴性对照组,剩余4组按造模方法进行单次20GY双肺照射造模。照造模成功后,根据给药不同分为中药高、中、低剂量组和模型组。中药高、中、低剂量组分别给予相当中药生药量为1.73g/ml、0.86g/ml、0.43g/ml的麻杏石甘汤灌胃(相当于正常人体20、10、5倍剂量),模型组和阴性对照组给予生理盐水灌胃,均2ml/天。连续给药8周。分别于第2、4、8周随机各处死3、3、4只大鼠,取标本备用。
1.5理化指标观察:采用ELISA法测大鼠血浆IL-6、PDGF浓度水平;用免疫组化SP法测大鼠肺组织IL-6、PDGF表达水平。
1.6数据处理:采用SPSS16.0 for Windows统计处理软件分析。计量资料实验数据以均数±标准差(x±s)表示。多组资料之间的比较采用单因素方差分析。以P<0.05为差异有显著性。
2、结果
2.1对大鼠血浆IL-6浓度的影响:实验结果显示,阴性对照组大鼠各时间段血浆IL-6均维持在一较低水平。经照射后,模型组大鼠血浆IL-6浓度水平升高,在第2周时达到高峰,各时间段均明显高于阴性对照组(P<0.01)。经中药干预后,中药高、中剂量组第2、4周明显低于模型组(P<0.01);第4周中药高、中剂量组低于低剂量组(P<0.05)。见表1。
2.2对大鼠血浆中PDGF浓度的影响:经照射后模型组大鼠血浆PDGF水平升高,在第4周时达到高峰,各时间段均明显高于阴性对照组(P<0.01)。经中药干预后,中药高、中剂量组血浆PDGF水平在各时期均低于模型组(P<0.05),中药低剂量组第4周低于模型组(P<0.05)。见表2。
2.3对大鼠肺组织IL-6表达的影响:实验结果显示,经照射后模型组大鼠肺组织IL-6水平升高,在第2周时达到高峰,各时间段均明显高于阴性对照组(P<0.01)。经中药干预后,中药高、中剂量组在第2、4周低于模型组(P<0.05或P<0.01),中药低剂量组各时间段均与模型组相近;中药各剂量组各时间段均无显著性差异(P0.05)。见表3。
2.4对大鼠肺组织PDGF表达的影响:经照射后,模型组大鼠PDGF浓度较阴性对照组升高,在第4周时达到高峰,且各时间段均明显高于阴性对照组(P<0.01)。经麻杏石甘汤干预后,中药高剂量组第2、4周低于模型组(P<0.05或
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