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实验六 叶绿体中色素的提取和分离 衡南县第五中学 王锦秋 周付良 本实验的地位和作用 光合作用主要讲述了光合作用的发现过程、叶绿体中的色素、光合作用的过程以及光合作用的重要意义等四个方面的内容，本节内容既是本章的重点和难点又是整个高中生物学中的重点和难点。本节中的叶绿体中色素的提取和分离实验主要是为了让学生初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法,动手探索叶绿体中有几种色素。 不足之处 (1)实验中运用滤纸作为层析材料，纸层析片存在一定的缺陷，实验中分离效果不是很明显。 (2)实验中用烧杯盛装层析液，用玻璃皿盖加盖，缺点是密封不好。 实验改进 （1）可用硅胶板代替滤纸作为层析材料（硅胶板是将硅胶粉涂布于铅箔或塑料片上支撑的新型层析材料），色素分离效果好，色素带清晰不扩散。 （2）用带有软木塞的大试管代替烧杯和玻璃皿，可以避免密封不好以及滤纸条滑落使滤液细线浸于层析液中导致实验失败。 （3）由于硅胶的吸附性与滤纸不同，故将层析液的比例改成石油醚：丙酮：苯=20：6：1 实验原理 叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂丙酮中，所以，可以通过研磨法用丙酮提取叶绿体中的色素。 层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同(溶解度高的随层析液在硅胶板上扩散得快；溶解度低的随层析液在硅胶板上扩散得慢。)，所以，可以用硅胶板层析法分离出叶绿体中的色素。 实验器材 新鲜的绿色叶片。 硅胶板，带软木塞的试管，研钵，小玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，小试管，药勺，量筒，天平。 丙酮，层析液，二氧化硅，碳酸钙。 方法步骤 1.提取叶绿体中的色素 （1）称取5g绿色叶片，剪碎，放入研钵中。 （2）向研钵中放入少量的二氧化硅和碳酸钙，再加入5mL丙酮，进行迅速、充分研磨。 （3）将研磨液过滤。将滤液收集到一个小试管内，即使用棉塞将试管口塞紧。 方法步骤 2.制备硅胶板条 将硅胶板剪成长6cm、宽1cm硅胶板条，将硅胶板条的一端剪去两角做标记，并在距这一端1cm处用铅笔画一条横线。 3.画滤液细线毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔画线处画出一条直的滤液细线。待滤液干后，再画两三次。 方法步骤 4.分离叶绿体中的色素 将层析液倒入试管中，再将画好滤液细线的硅胶板条固定在软木塞上，插入试管内，盖紧软木塞。注意，不能让滤液细线触到层析液。 5.观察实验结果 几分钟后，取出滤纸条。待滤纸条干燥后，观察硅胶板上的色素带有几条，每条色素带呈什么颜色 6.实验结束后用肥皂将手洗干净 实验效果 四条色素带清晰整齐，比原实验的现象更理想。 评价 由于实验中层析材料和器材的改进，使得实验现象有了明显的改善，无论学生在操作中是否精细，均能达到满意的效果，是该实验更加准确和具有说服力。 * *