弱电解质组分保留值随流动相pH值变化的规律131456随着色谱.DOC

§3.6.17 弱电解质组分保留值随流动相pH值变化的规律[13,14,56] 随着色谱技术的发展，人们不但可以利用高效液相色谱分离非电解质组分，而且还可以在反相色谱体系中分离弱电解质的物 质．在反相色谱体系中，弱酸性、弱碱性及两性电解质的电离度与流动相的氢离子浓度密切相关，而吸附剂选择性地吸附未电离分子．故可以通过改变流动相的pH值来调节物质的电离度，从而达到调节其保留时间的目的．因此可以说，利用改变流动相的pH值来调节弱电解质组分的保留时间也是液相色谱的特点． 在§3.5.4已经得到如下公式： (3.101)  (3.103) (3.104) 当流动相中强溶剂浓度固定后，以上三式可简化为： （3.215） （3.216） （3.217） 式中为常数． 图3.26 有机酸与pH的关系（曲线为计算值，点为实验值） 图3.27有机碱lnk’与pH的关系（曲线为计算值，点为实验值） 商振华等人考察了某些有机碱、有机酸以及氨基酸在反相色谱系统中与pH的关系．在实验中采用250mm长、内径4.6mm填充YWG-C18的柱管，以0.1mo;/L的KH2PO4冲液为流动相，其部分结果见图3.26-3.27及表3.36[11]． 表3.36有机酸、碱在反相色谱体系中计算值与实验值之比较（数据取自商振华报告） pH 香草酸 3,4-二羟基苯甲酸 去甲肾上腺素 肾上腺素 多巴胺 偏差 偏差 偏差 偏差 偏差 2.29 50.54 48．81 -1.73 9.28 9.07 -.21 .21 .20 -.01 .65 .64 -.01 1.45 1.43 -.02 3.24 43.27 45．95 2.68 8.23 8.62 .39 .17 .20 .03 .65 .60 -.05 1.45 1.38 -.07 4.52 22.28 20．95 -1.33 4.47 4.25 -2.22 .18 .20 .02 .66 .61 -.05 1.47 1.37 -.10 5.44 6.53 4．03 -2.40 1.46 .87 -.59 .27 .23 -.04 .73 .85 .12 1.57 1.78 .21 6.31 1.94 .58 1.36 .41 .13 .28 .41 .42 .01 1.25 1.23 -.02 2.35 2.32 -.03 平均偏差 1.90 .74 .02 .05 .05 pK 计算值 4.39 (A=49.20) 4.46 (A=9.14) 文献值 4.29 4.20 徐小平[56]用小檗碱等弱碱性化合物为样品考察了公式（3.216），证明了理论与实际结果大致上一致（表3.37,图3.28），但是在pH数值比较大时实验数据与理论计算还是可以看出明显差别。究其原因可能是固定相并不是完全不能吸附带电荷的离子。 表3.37 在反相色谱体系中小檗碱保留值计算值与实验值的比较 （数据取自徐小平报告） CB(V/V) pH 偏差 CB(V/V) pH 偏差 .65 3.49 .13 .23 .10 .55 3.20 .41 .57 .16 .65 4.45 .29 .31 .02 .55 4.20 .98 1.00 .02 .65 5.50 .35 .33 -.02 .55 5.26 1.11 1.08 -.03 .65 6.60 .39 .33 -.06 .55 6.30 1.12 1.09 -.03 .65 8.00 .48 .33 -.15 .55 7.80 1.24 1.09 -.15 .60 3.35 .28 .37 .09 .50 3.08 1.10 .91 -.19 .60 4.30 .54 .56 .02 .50 4.08 1.65 1.77 .12 .60 5.38 .63 .60 -.03 .50 5.12 1.79 1.95 .16 .60 6.41 .67 .60 -.07 .50 6.20 1.83 1.97 .14 .60 7.90 .77 .60 -.17 .50 7.65 2.19 1.97 -.22 图3.28 在反相色谱体系中小檗碱保留值计算值与实验值的比较（曲线为计算值，点为实验值） 乙 酸 乙 酯 浓 度 n 乙 酸 乙 酯 浓 度