猪精液碱性N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的纯化与酶学性质研究.DOC

猪精液碱性N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶性质（福建农林大学动物科学学院动物保健研究所福州 350002）·mg-1、纯化倍数为270.53倍的聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶制剂。酶催化对-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖（pNP-NAG）水解的最适pH为5.5，最适温度为50℃。该酶在pH 3.0～8.9区域较稳定；在45℃以下处理30 min，酶活力保持稳定。酶分子中亚基的分子量为58.03 kD,等电点为9.42。酶促反应动力学符合米氏双曲线方程，测得米氏常数Km为1.94 mmol·L-1，最大反应速度Vm为27.53 μmol·L-1·min-1。酶催化pNP-NAG反应的活化能为88.73 kJ·mol-1。【结论】本试验选用的分离纯化的方法是可行的。 关键词：猪精液；N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶；分离纯化；酶学特性 Study on Purification and Properties of the Alkaline N-Acetyl-β-D-glucosaminidase from Porcine Semen HUANG Xiao-hong, LUO Zhong-bao, LI Ming-wei, HUANG Yi-fan (Institute of Animal Health, College of Animal Science,