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银耳芽孢总蛋白提取方法的建立-食品科学
2015-11-10
银耳芽孢总蛋白提取方法的建立
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刘 洋，朱涵予，许丹云，张丽姣，马爱民
(华中农业大学食品科学技术学院，湖北 武汉 430070)
摘 要：采用超声波与高压均质破碎细胞，通过显微观察细胞破碎效果、Bradford 法测定蛋白含量并进行
SDS凝胶电泳分析，比较了Tris-饱和酚法、TCA/丙酮沉淀法及Tris-饱和酚结合TCA/丙酮沉淀法提
取银耳芽孢总蛋白的效果，结果表明：高压均质的细胞破碎效果优于超声波，三种方法所得到的蛋白含量
分别为2.33 、1.26 及1.02mg/mL，且Tris-饱和酚法所得电泳条带亮度及清晰度均优于其他两种方法。因此，
Tris-饱和酚法是进行银耳芽孢总蛋白提取的一种有效方法，可为银耳蛋白质生理功能的探索、蛋白质组学
的研究及在食品加工中的应用奠定基础，也为其他食用菌总蛋白的提取提供参考。
关键词：银耳；芽孢；蛋白提取方法
Extraction Method of Total Protein from Tremella fuciformis Yeast-like Conidia
*
LIU Yang, ZHU Han-yu, XU Dan-yun, ZHANG Li-jiao, MA Ai-min
(College of Food Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China)
Abstract ：In order to compare the total protein extraction effect from Tremella fuciformis yeast-like conidia by
Tris-saturated phenol method, TCA/acetone precipitation method and Tris-saturated phenol combined with
TCA/acetone precipitation method, cells were disrupted by ultrasound and high-pressure homogenization, the
effect of cell disruption was observed by microscope, protein content was determined by the Bradford method, and
SDSgel electrophoresis analysis was used. The obtained results showed that the effect of cell disruption by
high
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