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附件6 （论文中英文摘要格式） 作者姓名：裴东 论文题目：核桃不定根发生调控机制与蛋白组学探讨 作者简介：：裴东，女， 1964年02月出生，2001年08月师从于北京林业大学大学蒋湘宁教授，于2003年08月获博士学位。 中 文 摘 要 核桃无性繁殖困难，始终是困扰其发展的最为突出的问题。因为目前存在着：一方面新品种在不断涌现另一方面能规模化生产的品种却寥寥无几，这种不平衡性严重制约着核桃优种化和产业化进程, 是急待解决的重要课题。核桃无性繁殖难表现在常规扦插很难生根嫁接成活率不稳定、繁殖系数低等。因此，探索新方法、突破无性繁殖难关，深入研究不定根发生机制、根原基发生的调控规律显得尤为必要和迫切。 本研究主要以辽宁1号、奇异核桃等核桃品种和种间杂种为试材，围绕诱导复幼和提高生根率,从试管培养和嫩枝扦插两个方面开展研究，在解决了不定根发生关键技术的基础上，探讨了的形态、生理特征和；利用核桃成熟子叶生根模式，从组织、生理和生化以及分子水平上研究了根原基发生的调控机制，获得以下主要结果： 基本解决了品种核桃试管培养中生长势衰退和黄化问题，建立了良好的微插穗扩繁技术体系。从降低污染率和褐化率，提高萌发率等综合指标看新梢长至810个节位是适宜的取材时期；顶芽以下4、5节位是最佳取材部位；培养的优化条件是：BAP为0.51.0 mg?L-1、20d继代间隔变温培养即白天25±3℃和夜间18±2℃等；通过对生长势衰退的微插穗实行去除顶端处理，和对DKW培养基进行改良等方法，可有效地恢复其生长势、抑制衰老黄化及试管内开花； 试管内长期继代培养和二步生根法，成功地诱导核桃品种试管生根。这一技术在6个品种上应用，获得了60.5%～89.7%的生根率和2.0～3.6条/株平均根数的结果。二步诱导生根法即黑暗条件下，在IBA为5.0～10.0 mg?L-1的1/4 DKW培养基中诱导10～15d， 而后转移至不含IBA 的1/4DKW蛭石培养基中照光培养。此外，试验对根原基诱导过程中微插穗内源IAA和ABA水平变化进行了研究。从激素调控的角度解释核桃不定根的发生机制； 借鉴试管复幼诱导生根的经验，通过芽接或试管继代培养，获得幼化材料，再进行埋干处理，成功地诱导辽宁1号核桃品种嫩枝扦插生根。生根率达68%以上。在对芽接复幼植株埋干技术优化时发现，插穗黄化和IBA处理浓度是影响不定根发生的最主要内外因素，IBA适宜浓度为0.5mg?ml-1。将芽接植株埋干促根技术应用于核桃楸、黑核桃、山核桃、杂种核桃、黑樱桃、楸树、马褂木、红叶李、三毛杨和山杨等较难生根的木本植物上，生根率达53.9%～98%，获得了较满意的结果，说明这一技术在促进生根效果方面具有普遍性。开展了生根能力的形态、生理和生化指标的研究。微插穗的发育状态直接控制着不定根发生，选取生长旺盛、叶片夹角呈锐角、叶片小呈嫩黄绿色的幼态微插穗，是实现生根的首选材料；解剖学观察发现，长期继代复幼的微插穗茎横切面木质部所占的比例平均为28.32%，是初代培养的成熟态木质部所占比例的5.4倍；幼态插穗在不定根发生前IAA/ABA比值会出现高峰，成熟态不出现高峰；成龄微插穗明显地表达42.8kDa 和22.3kDa蛋白带，但幼态微插穗表达不明显在组织学、生理生化以及分子水平上研究了不定根形成的机制。以核桃成熟或近成熟种实子叶为试材，在1/4DKW基本培养基上培养，近胚端的生根率达100%，而中部和远胚端的生根率为0。在生根过程中近胚端内源吲哚乙酸（IAA）水平表现为初期上升，其后稳定在一定水平，当根原基开始生时（培养4d）出现一个高峰；而中部、远胚端内源IAA水平在培养初期下降，而后维持在一定的水平；蛋白质凝胶电泳分析表明：62.8kDa、54.2kDa 和38.4 kDa是与子叶不定根发生相关的蛋白质条带，在不定根发生过程中，该带在子叶近胚端表达增强，而中部、远胚端则消失。当培养基中附加一定水平的IBA（0.510mg·L-1）时，子叶中、远胚端被诱导产生不定根；附加2mg·L-1IBA其内源IAA的变化与子叶近胚端在1/4DKW基本培养基上发根时有相似的趋势；同时该处理启动了62.8 kDa蛋白质条带表达和抑制了54.2 kDa 和38.4 kDa蛋白质条带表达。反之当培养基中附加BAP抑制子叶生根，也抑制了与生根相关的IAA变化和蛋白质表达。这一研究成果和不定根发生研究模式的建立，为从分子上深入认识木本植物不定根发生机制提供了条件 利用蛋白组学技术对核桃子叶不定根发生期间表达的蛋白质进行了解析。在不定根分化期诱导5d有33个蛋白质上调节表达，40个蛋白质下调节表