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采样与样品制备技术 （五）采样及样品制备技术 A、 选择题 1、接种禽流感灭活疫苗后，进行免疫效果监测时，在家禽免疫后 天，随机采集家禽血清样品30份。（C） C.21天 2、下面不能作为样品保存液的是 。（B） B 蒸馏水 3、牛海绵状脑病病原检测时采取下面哪种组织（A） A. 脑 4、液态样品包装时不可超过容量的 。（C） C. 80% 5、采集血液样品用于动物血清学诊断时，采集双份血清监测比较抗体效价变化的，第一份血清采于病的初期，采集第二份血清应间隔 。（B） B. 2-3周 6、死亡动物的内脏病料采取，最迟不超过死后 小时。（D） D. 6 B、 判断题 1、采取供病理切片的组织病料时，应将典型病变部分及相连的健康组织一并切取。（√） 2、制作组织脏器材料抹片时，先用镊子夹持局部，然后以灭菌或洁净剪刀取一小块，夹出后将其新鲜切面在玻片上压印或涂成一薄片。（√） 3、欲作病毒分离的材料，最好在冷藏的条件下（装有冰块或干冰的冷藏瓶），立刻送到实验室。（√） 4、急性死亡的家畜解剖之前，必须用显微镜检查其血液涂片中是否有炭疽杆菌存在。（√） 5、采集乳汁，一定要采集最初所挤的3－4股奶。（×） 6、怀疑发生口蹄疫时，水疱液必须采自未破的水疱，不加任何保存液。（√） 7、若检查消化系统寄生虫，需采取5-19g新鲜粪便。（√） 8、作组织学检查的样品不能冷冻。（√） 9、血液染色涂片一般用革兰氏染色。（×） 10、脏器抹片要作姬姆萨染色，可用甲醇固定。（√） 11、检测狂犬病病原时应采取唾液和脑。（√） 12、实质脏器在短时间不能送到实验室的，如为供细菌检查的，应放于灭菌流动石蜡或灭菌的30%甘油生理盐水中保存。（√） 13、进行血清学检验的乳汁可以冻结、加热或强烈震动。（×） 14、用于寄生虫检验的粪便样品以冷藏不冻结状态保存。（√） 15、采集病料做病原菌检验时，应在药物未治疗前采取。（√） 16、血液样品在采集前一般禁食8小时。（√） C、 简答及问答题 1、采集血清用于实验室检测，对于血清质量有何要求？ 答：血清应未腐败（新鲜）、无溶血、清亮透明（无明显沉淀物）、未凝固或未完全凝固、体积足够检测和样品备份。（应回答其中3点以上） 2、简述采集活体牛、羊O-P液（咽食道分泌物）的技术要求？ 答：牛、羊O-P液的采集技术要求：被检动物在采样前禁食（可饮少量水）12小时；采样探杯在使用前经装有0、2%柠檬酸或1%-2%氢氧化钠溶液的塑料桶中浸泡5分钟，再用和动物体温一致的清水冲洗探杯后使用，每采完一头动物，探杯要重复进行消毒并充分清洗。采样时动物应站立保定，将探杯随吞咽动作送入食道上部10-15厘米处，轻轻来回抽动2-3次，然后将探杯拉出。如采集的0 -P液被反当胃内容物严重污染，要用生理盐水或自来水冲洗口腔后重新采样。取出8-10毫升O-P液，倒入含有等量细胞培养液或磷酸缓冲液的灭菌广口瓶中，充分摇匀加盖封口，放冷藏箱及时送检，未能及时送检应置于-30℃。 3、采样的一般原则 （1）凡是血液凝固不良，鼻孔流血的病死动物，应耳尖采血涂片，首先排除炭疽，炭疽病、死的动物严禁剖检。 （2）采样时应从胸腔到腹腔，先采实质器官做到无菌，避免外源性的污染，最后采集污染的组织，如胃肠组织、粪便等。 （3）采取的病料必须有代表性，采取的组织器官应病变部位明显。采取病料时应根据不同的疫病或检验目的，采其相应血样、活体组织、脏器、肠内容物、分泌物、排泄物或其他材料。病因不明时，应系统采集病料。 （4）病料应在使用治疗药物前采取，用药后会影响病料中微生物的检出。死亡动物的内脏病料采取，最迟不超过死后6 h(尤其在夏季)，否则，尸体腐败，难以采到合格的病料。 （5）血液样品在采集前一般禁食8 h，采集血样时，应根据采样对象、检验目的及所需血量确定采血方法和采血部位。 （6）采样时还应考虑动物福利，并做好个人防护，预防人畜共患病感染。 （7）防止污染环境，防止疫病传播，做好环境消毒和废弃物的处理。 4、采样前应当准备好哪些用品、材料和试剂？ 答：1、器械：采样箱、保温箱或保温瓶、解剖刀、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、碘酒棉、注射器及针头等；样品容器包括小瓶、玻片、平皿、离心管及易封口样品袋、塑料包装袋等；试管架、铝盒、瓶塞、无菌棉拭子、胶布、封口膜、封条、冰袋等。 2、采样记录用品：不干胶标签、签字笔、记号笔、采样单、采样登记表等。3、保存液：甘油盐水缓冲液、肉汤、PBS液、双抗、抗凝剂等。4、防护用品 。 5、在口蹄疫诊断中，应采集哪些组织样品？ 用于病毒分离、鉴定的样品以发病动物(牛、羊或猪)未破裂的舌面或蹄部、鼻镜、乳头等部位的水泡皮和水泡液