P0012S BCA蛋白浓度测定试剂盒.pdfVIP

BCA蛋白浓度测定试剂盒 产品编号 产品名称 包装 P0012S BCA蛋白浓度测定试剂盒 200次 产品简介： BCA 蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而 成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。 灵敏度高，检测浓度下限达到25µg/ml，最小检测蛋白量达到0.5µg，待测样品体积为1-20µl 。 在50-2000µg/ml浓度范围内有较好的线性关系。 BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100 ，5%的 Tween 20, 60, 80 。但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA ，二硫苏糖醇低于1mM， β-巯基乙醇低于0.01% 。不适用BCA法时建议试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006) 。 BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质的详细的兼容性，请参见碧云天如下网页: /Compatibility Chart For BCA Kit.pdf 每个试剂盒可以检测200个样品。 包装清单： 产品编号 产品名称 包装 P0012S-1 BCA试剂 A 40ml P0012S-2 BCA试剂 B 1.2ml P0012S-3 蛋白标准(BSA) 20mg P0012S-4 蛋白标准配制液 1ml — 说明书 1份 保存条件： 室温保存。蛋白标准配制成溶液后-20℃冻存。 注意事项： 需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。需96孔板。如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测 定，但测定时，需根据比色皿的最小检测体积，适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积，样品和标准品的用 量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006) 。 为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。 EDTA浓度必需小于10mM，不兼容EGTA 。不适用BCA法时，请试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006) 。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 1. 取0.8ml蛋白标准配制液加入到一管蛋白标准(20mg BSA) 中，充分溶解后配制成25mg/ml 的蛋白标准溶液。配制后可立即 使用，也可以-20 ℃长期保存。 2. 取适量25mg/ml 蛋白标准，稀释至终浓度为0.5mg/ml 。例如取20µl 25mg/ml 蛋白标准，加入980µl 稀释液即可配制成 0.5mg/ml蛋白标准。蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS 稀释标准品。稀释后的0.5mg/ml蛋白标准也可以-20 ℃长期保存。 3. 根据样品数量，按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液，充分混匀。例如5ml BCA试剂A加 100µlBCA试剂B ，混匀，配制成5.1ml BCA工作液。 BCA工作液室温24小时内稳定。 4. 将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20µl加到96孔板的标准品孔中，加标准品稀释液补足到20µl 。 5. 加适当体积样品到96孔板的样品孔中，加标准品稀释液到20µl 。 6. 各