5-HTTLPR基因多态与双相障碍及其情感气质类型的研究.pdfVIP

No.ll 苑成梅，等: 5-HπLPR 基因多态与双相障碍及其情感气质类型的关联研究 • 1.5 19 • 一种由长(L) 等位基因和短(S) 等位基因构成40 - 1.2 5-HTILPR 基因分型 46 bp 的插入/缺失多态。这一变异会影响基因的转 1. 2.1 DNA 提取抽取研究对象外周静脉血2 mL , 置于 EDTA 抗凝管中，其中 1 mL 于 -20 c冷冻保存 录能力，L 等位基因的转录能力是S 等位基因的 2 倍 以上[1] 。近年发现 L 等位基因内还存在 1 个单核昔 备用，1 mL 用于提取 DNA。使用天根生化科技(北 酸多态性 (single nucleotide polymorphism , SNP) 京)有限公司的离心柱型血液基因组 DNA 提取试剂 (NCBISNP 数据库编号:rs25531 A/G 多态) ，构成了 盒提取 DNA。 1.2. 2 5-HTTLPR 的 S 和 L 等位基因分型 利用聚 功能性的三等位基因，包含 A 多态的 L 等位基因、包 A 合酶链反应(PCR) 技术进行基因分型。 PCR 试剂为 Lc等位基因和 S 等位基因;已有文献[2] 报道 G 含 的 大连 TaKaRa 公司产品，PCR 扩增引物参照Lesch 等 L 等位基因导致相应的功能增加， Lc 则与 S 等位基 A 的设计lli ，由上海英骏生物技术有限公司提供。上 因功能相当。目前这一多态与双相障碍的关系已布 游引物序列:5-GGCGTIGCCGCTCTGAATGC-3 ;下游 报道，但结论不一[3 剖，国内尚未见相关研究。 1 引物序7J :5-GAGGGACTGAGCTGGACAACCACG-3。 5-HπLPR 的另一个特点是可能与人格、气质的 PCR 反应体系为 30μL，含基因组 DNA 1μL，上、下 遗传基础相关。美国有研究提示 5-HπLPR 可能与 游引物各0.5μ、 dNTP 1. 8μL， PrimeSTAR DNA 聚 焦虑人格、循环气质和抑郁气质相关[6 刑，但韩国在 合酶0.3μL， 1 x PrimeSTAR 聚合酶缓冲液3μL，体 健康人群中的研究未发现 5-HTILPR 与情感气质特 积分数为 10% 的二甲基亚枫3μLo PCR 反应程序: 质的相关性[9] 。本研究旨在采用病例一对照研究方 95 l:预变性 3 min ;94 l:变性 20 s 、 63 吃退火 208、 式，分析汉族人群中 5-HπLPR 与双相障碍的关联及 72 l:延伸 30 s ，共 33 个循环;7