Eca109细胞中自噬模型的建立.pdfVIP

Vol. 37 NO.6 第 37 卷第6 期 暨南大学学报(自然科学与医学版) 2016 年 12 月 Joumal of Jinan University( Natural Science Medicine Edition) Dec. 2016 Ecal09 细胞中自噬模型的建立 李晓苗1 ， 刘伊宁1 ， 来雯婷1 ，吉别克·瓦提别克1 ， 美丽吾尔提·达吾列提汗l ， 李惠武3 ，李卉4 沙亚哈提·别尔克哈之1 ， 王海峰2 ， 李 颖1 ， (新疆医科大学1.基础医学院;2. 附属肿瘤医院; 3. 附属肿瘤医院肿瘤研究所; 4. 中心实验室，新疆乌鲁木齐830011 ) [摘 要] 目的:在食管鳞癌细胞 Eca109 中建立自噬模型.方法:按照常规细胞培养方法，将 pmche町-GFP-LC3 质粒转染进入Eca109 细胞， mche町为红色荧光蛋白，GFP 为绿色荧光蛋白，可示踪自噬体形成.加入浓度为 50 nmoVL 自噬激活剂雷帕霉素，建立自噬模型.采用电镜观察雷帕霉素诱导后细胞中自噬小体的产生，激光共聚焦显 微镜观察自噬发展的阶段，并对发生自噬行为的细胞进行计数.结果:雷帕霉素诱导后可见明显的自噬小体，激光 共聚焦采图可见自噬细胞数量明显增多(P 0. 05). 结论:1.在 Eca109 细胞中通过加入自噬诱导剂雷帕霉素成功构 建细胞自噬模型;2. 细胞自噬模型的建立为研究肿瘤细胞自噬活动的现象和分子调控机制提供了新的实验平台. [关键词] 食管鳞癌; Eca109 细胞; 自噬; 雷帕霉素 [中固分类号] R73 - 3 [文献标志码] A [文章编号] 1 ∞o - 9965 (2016) 06 - 0492 一 05 doi: 10. 11778/j.jdxb. 2016. 06. 009 Ecal09 autophagy in the cell model I I I I I 口 Xiaomiao ， LIU Yining , LAI Wenting , Jibieke Watibieke , Meiliwuerti Dawulietihan , I 2 I 3 4 Shayahati Bieerkehazhi , WANG Hai feng , LI Ying , LI Huiwu , LI Hui ( 1. Basic Medicine School , Xinjiang Medical University; 2. Department of