第三章 紫外可见分光光度法1.ppt

溶剂对吸收波长?的影响 溶剂对峰形的影响 一、基本组成 general process 2.单色器 3.样品室 第三节 紫外－可见分光光度计 岛津UV-1240紫外可见分光光度计 上海棱光752S(PC)紫外-可见分光光度计 光源 单色器 样品室 检测器 显示 1. 光源 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500 nm。 紫外区：氢、氘灯。发射185～400 nm的连续光谱。 钨灯 氘灯 * * 第三章 紫外－可见吸光光度法 Ultraviolet-Visible Absorption spectrometry 本章目标： 一、懂得UV-Vis吸光光度法的定义； 二、理解UV-Vis吸光光度法的工作原理； 三、了解UV-Vis吸光分光光度计的构造； 四、学会其仪器的操作和懂得如何利用该方法对样品进行分析测定。 回顾上节 基于物质光化学性质而建立起来的分析方法称之为光化学分析法。 分为:光谱分析法和非光谱分析法。 光谱分析法是指在光（或其它能量）的作用下，通过测量物质产生的发射光、吸收光或散射光的波长和强度来进行分析的方法。 回顾上节 分子跃迁类型和分子光谱类型 跃迁类型：电子跃迁、振动跃迁、转动跃迁 分子光谱类型：吸收光谱、发光光谱 吸收光谱： 电子跃迁——紫外可见光谱 振动转动跃迁——红外光谱 回顾上节 本章目录 第一节 概述 第二节 紫外－可见吸收光谱 第三节 紫外－可见分光光度计 第四节 紫外－可见吸收光谱法的应用 第一节 概述 1.吸收光谱 2.朗伯－比尔定律 可见光区：400-750 nm 紫外光区：近紫外区200 - 400 nm 远紫外区10 - 200 nm （真空紫外区） 单色光：某一个波长的光，如253nm的光、740nm的光。 白光(太阳光)：由各种单色光组成的复合光。 1. 吸收光谱 光的互补性：某一波长的光必有另一特定波长的光与之混合后组成白光。 造成我们这个世界色彩斑斓的本质是什么？ 这是由于物质对光的选择性吸收； 分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度不同； 如果用不同的波长的光对某一个溶液进行扫描，可得下面一条曲线—— 最大吸收波长λmax 最大吸收峰 最大吸收值 2.朗伯－比尔定律 吸光度A：指物质的吸光强度， A＝lg（I0/It) 布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系。A∝b 1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系。A∝ c 朗伯—比耳定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。应用于各种光度法的吸收测量； 摩尔吸光系数ε在数值上等于浓度为1 mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度； 二者的结合称为朗伯—比耳定律，其数学表达式为： A＝lg（I0/It)= εb c 式中A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度； b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位； c：溶液的摩尔浓度，单位mol·L－１； ε：摩尔吸光系数，单位L·mol－１·cm－１； 定量分析的例子 使用紫外可见分光光度法测定KMnO4溶液的浓度。 第一步：标准曲线的绘制 浓度（mg/L） 0.1 0.2 0.3 0.4 吸光度A 0.402 0.793 1.25 1.60 第二步，样品的测定 序号 1 2 3 吸光度A 0.800 0.805 0.813 浓度（mg/L） 0.198 0.199 0.201 平均浓度 0.199 相对平均偏差％ 0.50％ 第二节 紫外－可见吸收光谱 1.紫外—可见分子吸收光谱与电子跃迁 2.紫外可见分析法的几个术语 3. 吸收光谱的影响因素 物质分子内部三种运动形式： （1）电子相对于原子核的运动 （2）原子核在其平衡位置附近的相对振动 （3）分子本身绕其重心的转动 分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能级 ΔΕeΔΕvΔΕr 1.紫外—可见分子吸收光谱与电子跃迁 于是，分子存在这三种