长春碱的提取分离.docVIP

长春碱简介 分子式：C46H58N4O性质：? 又称长春质，花碱。吲哚类生物碱。 学名：catharanthus roseus ⑴基本资料： 英文名：Madagascar periwinkle 科属：夹竹桃科，长春花属 别名：五瓣莲、日日草、山矾花 形态特征：多年生草本，做一年生栽培，全草长30-50cm。叶对生，长椭圆状，基本楔形，短柄，全缘，两面光滑，主脉白色明显，长3-6cm，宽1．5-2．5cm，先端钝圆，具短尖。花单生或数朵腋生，花筒细长，约3cm，花冠五裂片，花色为蔷薇红，纯白及白色，喉部具红黄斑。萼片线状。气微，味微甘、苦。花期春至深秋。此植物，喜欢温暖、稍干燥和阳光充足的环境，若生长在荫庇处，叶片会发黄、落叶。 ⑵药用历史及药用前景： 长春花最早为观赏植物，也为南非、斯里兰卡和印度等的传统民间用药，多用于治疗糖尿病，后被发现具有抗癌作用，现为国际上应用最多的抗癌植物之一，在中国长春花作为药用，始于《植物名实图考》，主要产于非洲及中国南方各省区。 随着当今世界肿瘤发病率日益增高，对抗肿瘤药物的需求与日剧增，长春花具有显著而独特的抗肿瘤作用，已成为当今抗肿瘤的重要药物，由于传统方法提取生物碱收率低，故化学合成和生物合成技术已应用于该领域，今后在扩大长春花生物碱的来源和产量的同时，应着眼于降低生物碱的毒性和增强对肿瘤细胞的靶向性，将长春花的抗肿瘤作用更好的用于临床。 3.长春花中长春碱的提取 首先取成熟的长春花地上全株，烘干，待用。 （1）所用试剂： 苯 6%酒石酸溶液 氯仿，氨水 无水乙醇，5%硫酸 甲醇 氧化铝 蒸馏水 75%乙醇 ⑵基本思路： （2）具体流程： 长春花全草干粉 具体说明： ①渗漉：长春花全草干粉（过80目筛孔），加自来水以1:0.3的比例拌匀，放置约0.5小时，投入预先放好苯的渗漉桶中浸没，加盖密闭48小时后开始渗漉，随时添加苯以防表面流干。 ②萃取：收集生药粉5倍量的苯渗漉液，与6%的酒石酸在四支串连的玻璃管中，进行液液逆流萃取，当第一管的酸水PH为4时，放出，换入新配置的酒石酸溶液继续萃取，直至苯液全部交换完，放出1~3管中的酸水液，置分液漏斗中。 ③再萃取：先加入0.4倍的氯仿，然后加约14%氨水调节PH至6~7，振摇，放出氯仿层，以后又用水溶液体积的0.2倍氯仿振摇3次，氯仿提取液静置去水。减压蒸干，然后加少量丙酮抽松，得总弱生物碱。 ④纯化：将总弱生物碱加1~1.5倍甲醇溶解，放置过夜，滤去结晶，收集甲醇滤液减压蒸干、抽松。 ⑤再纯化：将上一步得到的游离碱加0.5倍无水乙醇溶解成浓溶液，然后加5%硫酸乙醇溶液至PH3.8~4.1，放置过夜，析出混合长春碱硫酸盐。滤出结晶。 ⑥萃取提纯：将上步的结晶，加1.5~2倍的蒸馏水溶解，移入分液漏斗中，先加1.5倍量氯仿，然后加约14%的氨水调节PH至8~9，摇晃，将游离碱提入氯仿，直至最后振摇的氯仿不呈现明显的生物碱反应为止，共约提6次，氯仿提取液加无水硫酸钠干燥，滤出硫酸钠，滤液减压蒸干，得纯化游离弱碱。 ⑦长春碱长春新碱的分离：将上述纯化游离弱碱，在真空干燥器中充分干燥后，按1g用30g氧化铝的比例，在氧化铝柱上层析分离，洗脱溶剂为苯—氯仿混合液（相对密度1.30）。 ⑧后处理： 将前段洗脱液抽干（放入P2O5的真空干燥器中干燥12小时以上），称重，加无水乙醇1.5~2倍溶解，再加5%的硫酸乙醇混合液调节PH至2.8~4.1，密塞再25。C下放置48小时，析出长春碱硫酸盐结晶，滤出少量无水乙醇，立即移至真空干燥器中干燥，即为硫酸长春碱粗品。 中段洗脱液为长春次碱及交叉混合物。 后段洗脱液经减压蒸干，置真空干燥器中干燥后称重，加无水乙醇1.5~2倍溶解，再加5%硫酸乙醇混合液调节PH至3.8~4.1“（偏3.8），在25。C下放置48小时，析出的晶体即为长春新碱的硫酸盐粗品。 ⑨精制：（补充） 加蒸馏水和甲醇使硫酸长春碱粗品在60C左右全部溶解，过滤，容器用甲醇洗涤，滤液合并，减压回收甲醇，立即将150倍量预先加热至沸的无水乙醇加入，迅速摇匀后放置，很快析出白色结晶，放置一段时间之后，滤出针晶，干燥，既得硫酸长春碱精品，熔点284C 硫酸长春新碱粗品加少量甲醇溶解，过滤，减压浓缩掉部分甲醇，加入30倍量无水乙醇摇匀，放置过夜，滤出析出的结晶，放置于干燥器中抽干，即为精制硫酸长春新碱,熔点218~220C。 4.长春碱结构分析的一般思路： 作为结构较复杂的吲哚类生物碱，长春碱的结构分析，必须采用多种方法，统筹分析，面面俱到。主要介绍各个方法在此的作用： ⑴生物碱分子的化学裂解法： 主要作用是了解N原子在分子中的结合状态，主要有Hofmann 降解法和 Emde降解法。