第五章 紫外-可见分子吸收光谱法(定稿).ppt

第五章 紫外可见分子吸收光谱法 紫外－可见分子吸收光谱:研究分子对190～750nm范围内光的吸收。光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法。 特点： ① 仪器简单，操作简便，便于普及。 ② 灵敏度高，适用于微量组分的测定。 ③ 准确度高，相对误差2~5%。 ④ 选择性好。 ⑤ 应用广泛——定量、定性及简单的结构分析； 适用于常量、微量及多组分的测定。 一、朗伯-比尔定律 朗伯-比尔定律是分光光度法定量的依据，由实验观察得到的。 当一束平行单色光通过单一均匀的、非散射的吸光物质溶液时，溶质吸收了光能，光的强度就要减弱。溶液的浓度c愈大，液层厚度b愈厚，入射光愈强，则光被吸收的愈多，光强度的减弱也愈显著。 或 式中：A ——吸光度（absorbance)； T ——透光度,T=I/I0； I0——入射光强度； I ——透射光强度； α——吸光系数； ε——摩尔吸收系数 b —— 液池厚度， 如果c以 g·L-1为单位，则α的单位为L·g-1·cm-1。 如果c以 mol·L-1为单位，则此时的吸光系数称为摩尔吸收系数，单位为L·mol-1·cm-1。 参比溶液调节仪器： 例 ： 铁（?）质量浓度为5.0×10-4 g·L-1的溶液，与1，10-邻二氮杂菲反应，生成橙红色配合物。该配合物在波长508nm，比色皿厚度为2cm时，测得A=0.19。计算1，10-邻二氮杂菲亚铁的α及ε。 二.吸光度的加和性 多组分体系中，只要各种吸光物质之间没有相互作用，这时体系的总吸光度等于各组分吸光度之和，即吸光度具有加和性。 三、比尔定律应用的局限性 以吸光度为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标作图。根据朗伯-比尔定律，应得到一条通过原点的直线。该直线称为标准曲线或 工作曲线。 实际工作中，常会发生偏离。 1.比尔定律本身的局限性 Beer定律适用的一个前提：稀溶液（假设吸光粒子是独立的，彼此无相互作用） 浓度过高（通常0.01mol·L-1），会使C与A关系偏离定律。 例如，重铬酸钾在水 溶液中存在如下平衡，如果稀释溶液或增大溶液pH，Cr2O72-就转 变成CrO42-,吸光质点发生变化，从而引起偏离比尔定律。如果控制溶液在高酸度时测定，由于六价铬以重铬酸根形式存在，就不会引起偏离。 假设入射光仅由两种波长的光组成，两波长下比尔定律是适用的。 （一）光源 光源的作用是提供辐射——连续复合光 可见光区 钨灯（320-2500nm ）、碘钨灯 优点：发射强度大、使用寿命长 紫外光区 氢灯、氘灯 160-375nm 氘灯的发射强度比氢灯大2 ~3倍 玻璃对这一波长有强吸收，必须用石英光窗。 紫外—可见分光光度计同时具有可见和紫外两 种光源。 （二） 单色器 单色器是从连续光谱中获得所需单色光的装置。常用的有棱镜和光栅两种单色器。 棱镜单色器的缺点是色散率随波长变化，得到的光谱呈非均匀排列，而且传递光的效率较低。 光栅单色器在整个光学光谱区具有良好的几乎相同的色散能力。因此，现代紫外—可见分光光度计上多采用光栅单色器。 （三）吸收池 吸收池是用于盛放溶液并提供一定吸光厚度的器皿。 它由玻璃或石英材料制成。 玻璃吸收池只能用于可见光区。最常用的吸收池厚度为1cm。 （四）检测器 检测器的作用是检测光信号。常用的检测器有光电管和光电倍增管。 1.光电管 光电管由一个半圆筒形阴极和一个金属丝阳极组成。当照射阴极上光敏材料时，阴极就发射电子。两端加压，形成光电流。 ——蓝敏光电管为铯锑阴极。适用波长范围：220-625nm —— 红敏光电管为银和氧化铯阴极。适用波长范围： 600-1200nm。 ??2.光电倍增管 光电倍增管是检测微弱光信号的光电元件。 它由密封在真空管壳内的一个光阴极、多个倍增极（亦称打拿极）和一个阳极组成。 通常两极间的电压为75-100V，九个倍增极的光电倍增管的总放大数为106-107 光电倍增管的暗电流是仪器噪音的主要来源 （五）信号显示器 常用的显示器有检流