肺炎克雷伯杆菌菌毛类型鉴定-血凝试验.pptxVIP

肺炎克雷伯杆菌血凝试验;目的鉴定多株临床分离株菌毛类型;凝集反应的一般原理 定义： 颗粒性抗原(如细菌或红血球)的悬液与含有特异性抗体的血清混 合，在适量电解质存在的情况下，经过一定时间，出现肉眼可见 的凝集块。（抗原-凝集原， 血清抗体-凝集素）。 机制： （1） 抗原与其相应抗体间存在的极性基的相互吸附， 除去了抗原外周的水化膜，亲水溶胶变成憎水溶胶。 （2） 电解质具有降低电位的作用，使抗原颗粒间的排斥力消 除 用途： （1）细菌的抗原分析、鉴定及分型， （2） 已知细菌检查未知血清的抗体;血凝反应的一般原理 凝集素是一类能与糖专一、非共价可逆结合，促使细胞凝集的糖蛋白 植物 凝集素 phytohemagglutinin 动物 凝集素 hemagglutinin 微生物凝集素 微生物凝集素 细胞表面（菌毛、纤毛） 细胞浆 细胞外 机理：通过对宿主细胞糖基的识别而实现对宿主的感染 ;肺炎克雷伯杆菌菌毛主要为Ⅰ型菌毛和III型菌毛;P 菌毛：凝集人P血型RBC，对甘露糖不敏感，可与Ⅰ型菌毛区别。 菌毛为(3-7)nm×(2-3)nm 的纤细物,从菌细胞周围放射而出,与Ⅰ型菌毛形态相似,但用聚丙烯酰胺凝胶电泳，两者出现不同的区带可以区别。 Svenson 和Mollby建立方法：人工合成P血型受体α-D-Galp-(1-4)-β-D-Galp-糖苷包被某种载体微粒，作成悬液，再加入大肠杆菌悬液，如此菌有P菌毛，10秒出现凝集，此法叫做PPA试验 P菌毛能与P血型人和狒狒红细胞以及泌尿道上皮细胞高度结合而不与豚鼠红细胞结合 P血型人尿道上皮细胞有P菌毛受体存在 Svenson SB,etal:infection 1982 10(4):209 MollbyR,etal:infection 1983 11(10:68;;;http://www.gekkeikan.co.jp/RD/research/bio002.html;To understand the HI assay, we must discuss the hemagglutination assay. Influenza virus particles have an envelope protein called the hemagglutinin, or HA, which binds to sialic acid receptors on cells. The virus will also bind to erythrocytes (red blood cells), causing the formation of a lattice. This property is called hemagglutination, and is the basis of a rapid assay to determine levels of influenza virus present in a sample. To conduct the assay, two-fold serial dilutions of a virus are prepared, mixed with a specific amount of red blood cells, and added to the wells of a plastic tray. The red blood cells that are not bound by influenza virus sink to the bottom of a well and form a button. The red blood cells that are attached to virus particles form a lattice that coats the well. The assay can be performed within 30 minutes, and is there