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肺炎链球菌检测 培养、鉴定、分型 简介 肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae，SP）简称肺炎球菌（pneumococcus）。1881年首次由巴斯德（Louis Pasteur）及G. M. Sternberg分别在法国及美国从患者痰液中分离出。为革兰染色阳性，菌体似矛头状，成双或成短链状排列的双球菌，有毒株菌体外有化学成分为多糖的荚膜。5%～10%正常人上呼吸道中携带此菌。有毒株是引起人类疾病的重要病原菌。 标本中SP形态 分布 在自然界中分布广泛，常生活在正常人的鼻咽部，多数不致病或致病力很弱，少数致病力较强。 在免疫力下降时致病。尤其在呼吸道病毒感染后或婴幼儿，年老体弱者易导致肺部感染。 无论从哪种标本中分离出肺炎链球菌，均应及时报告。 国外感染情况 在美国，每年侵袭性SP感染的发生率为72-103/10万儿童，而欧洲为10-24/10万儿童/年。每年约有600多万例中耳炎由SP引起，占急性中耳炎30-50％；在发展中国家，每年约有500万5岁以下儿童死于SP引起的肺炎，10-50万儿童死于SP引起的脑膜炎。（2005年） 国内情况 国内最早儿童肺炎链球菌脑膜炎个案报告在1942年。60年代中期以前研究资料显示SP肺炎、脑膜炎在冬春季发病较多，儿科住院病人中常见病例多发生在婴幼儿。SP性脑膜炎占化脑的11.1-22.1％，仅次于流脑。SP也是小儿肺炎的重要病原菌之一，SP所致大叶性肺炎，5岁以下儿童中可占70％ 国内情况 80年代后的研究资料显示SP脑膜炎占同期化脑的79.8％。SP引起的败血症还是少见，约占5％左右。一项13岁以下儿童中耳炎病原学研究显示SP引起的感染占病例31.7％，是最常见的病原菌。 广东地区情况 我院2006年参与惠氏《中国住院儿童肺炎流行病学调查》研究，从入选的1097例肺炎住院儿童的痰标本中检出肺炎链球菌79例，检出率为7.2%。（中国抗感染化疗杂志） 我院2005年-2007年检出313株SP，10株来自血液培养（10/513），脑脊液25株（25/113），中耳炎患儿的炎症分泌物检出26株SP（26/133），来自呼吸道感染患儿的痰或咽拭子标本的SP有252株（252/1412）。（广东医学） 广东地区情况 我院2005-2009年从化脓性脑膜炎患者脑脊液中共检出81株SP（24.18%，81/335）。（临床儿科杂志） 我院2011-2012年从中耳炎患者耳分泌物中检出270株SP（36.78%，270/734）。 我院2012年从五官科腺样体手术病人的腺样体或扁桃体组织中检出SP104株（40.78%，104/255）。 致病性 在化脓性球菌中，肺炎链球菌的致病力仅次于金黄色葡萄球菌。 肺炎球菌主要的致病物质 有荚膜，肺炎链球菌溶素O，脂磷壁酸和神经氨酸酶等。荚膜具有抗原性，是肺炎链球菌分型的依据。 所致疾病 主要引起大叶性肺炎，成人中75%由1,2,3,4,5,7,8,9,12型引起，半数以上为1,2,3型。3型产生大量荚膜物质，毒力强，病死率高。儿童以第6,14,19及23型肺炎链球菌感染最常见.可继发胸膜炎，脓胸，中耳炎，脑膜炎和败血症等。 肺炎链球菌感染的临床症状 在儿童起病多急骤（少数患儿先有轻微的上呼吸道感染症状），中毒症状重。突然高热、体温可达40℃～41℃，头痛、胸痛、呼吸急促，烦躁不安，早期往往不咳嗽或轻咳，病儿常不吐痰。年长儿可有寒战、咯吐铁锈色痰，但有的患儿仍咳黄脓痰。重症患儿可有惊厥、谵妄及昏迷等中毒性脑病的表现 。 实验室常规检测 标本来源 痰、咽拭子、中耳分泌物、血液、脑脊液等。 分离培养 血琼脂培养基。初次分离最好提供5%-10%CO2。 常规鉴定 Option敏感试验、菊糖发酵试验、胆汁溶菌试验等。 SP培养呼吸道标本的采集 1.抗菌药物使用前取材； 2.最好清晨采取痰标本； 3.疑似细菌性肺炎患者痰标本每天一次，连续2-3天，不建议24h内多次送检，除非痰液外观性状发生明显改变； 4.自然咳痰法取样可用于成人，先应刷牙、清水漱口，量不少于1mL； SP培养呼吸道标本的采集 5.儿童以支气管镜抽吸为佳，肺泡灌洗液也不错，或者用弯压舌板压舌，棉拭子伸入咽部取样（临床医生操作）； 6.其他的经人工气道吸引分泌物、穿刺取样、胃内取样均可以取得合格标本（临床医生操作）。 SP培养呼吸道标本的运输和保存 尽快送检，要求2h内送到； 肺炎链球菌延迟送检极有可能死亡，而且不适合4℃保存； 标本处理前检测是否合格。 痰标本合格的标准： 痰标本 鳞状上皮细胞 白血球 细菌种类 合格 =10/低倍 =10 1-3种 不合格 =25/低倍