分光光度法测定蔬菜中铁的含量.docVIP

分析化学开放性设计实验报告 ——分光光度法蔬菜中铁的含量目前，测定铁的方法主要有原子吸收光谱法、催化荧光法、磺基水扬酸分光光度法、EDTA配位滴定法、邻菲罗啉分光光度法、荧光酮分光光度法、萃取光度法、双波长分光光度法[10]、差示光度法、催化动力学光度法、表面活性剂增敏铁()-EDTA-H2O 体系光度法等。 这些方法均被用于痕量铁的测定，各有利弊，本研究采用的是邻菲罗啉分光光度法，这种方法快速、准确、灵敏度高且操作简便。1．通过分析化学综合性实验、设计性实验，培养学生初步的解决分析化学实际问题的能力，培养学生的创新意识与创新能力。 2．学习查阅参考文献、综合参考资料、设计小型分析化学实验。 3．复习和巩固有关理论基础知识并用于指导实践。 4．进一步熟练掌握实验操作技术。 实验原理 在pH值为4~6的条件下，用盐酸羟胺将Fe3+完全还原成Fe2+，Fe2+与邻罗菲啉试剂生成桔红色的络合物，再用分光光度计测其吸光度，进而根据朗伯-比尔定 1.主要仪器与设备：722型分光光度计，马福炉，电热炉，容量瓶，移液管，普通天平，电子天平，比色管，电子天平，烧杯，移液管，比色皿，漏斗及漏斗架等。 2.试剂： （1）1mg/ml铁标准溶液：准确称取0.8600g 分析纯NH4Fe(SO4)2?12H2O，置于烧杯中用3ml 2mol/L盐酸溶解后移入100ml容量瓶中，定容，摇匀。 （2）10ug/ml 铁标准溶液：由100ug/ml的铁标准溶液溶液准确稀释10倍而成 （3） 0.1%邻二氮杂菲溶液：准确称取邻二氮杂菲0.1g，置于烧杯中加热溶解后，移入100ml容量瓶中，定容，摇匀。?????? （4）5%盐酸羟胺溶液：称取盐酸羟胺固体10g，用量筒量取80ml水加热溶解，转移至100ml容量瓶中，定容，摇匀。 （5）1mol/L NaAc 溶液：称取NaAc固体13.6g，置于烧杯中溶解后，移入100ml容量瓶中，定容，摇匀。 (6) 4 mol/L NaOH溶液：称取16g NaOH固体溶于烧杯中，冷却后转移入100ml容量瓶中，定容，摇匀。 (7) 2mol/l HCl溶液：用移液管准确移取浓盐酸10ml于50ml容量瓶中，定容，摇匀。 (8) 1：1 HCl溶液：用移液管准确移取浓盐酸25ml于50ml容量瓶中，定容，摇匀。 3.实验用品：菜干。 实验步骤 一.样品处理： 用研钵将菜干磨成粉末，准确称取菜干粉末0.4932g，放入锥形瓶中，加入25ml浓硝酸和3ml浓硫酸，盖上表面皿，然后将锥形瓶放在酒精灯上煮沸至棕色，冷却，逐滴加入1~2ml浓硝酸，再煮沸，重复以上操作。当最后一次加浓硝酸不在变棕色时，停止加入浓硝酸，继续加热至冒白烟并持续1~2分钟，溶液保持淡黄色，冷却，静置，过滤。取滤液于250ml烧杯中，用6mol/L氢氧化钠溶液调pH在4~6之间，定量移入容量瓶，加蒸馏水至刻度，摇匀，作为待测液。 二.条件试验： 1.最佳波长的测定： 准确移取5ml10ug/ml铁标准溶液于50ml容量瓶中，加入2ml10%的盐酸羟胺溶液，摇匀， 冷却，2min后加入5ml1mol/L的NaAC 溶液和3ml 0.1%邻二氮杂菲溶液，定容，摇匀。在722型分光光度计上用1cm比色皿，以水为参比溶液，用不同波长430—580 nm,每隔10nm测吸光度，并绘制吸光度——波长曲线找出最佳波长区间。 吸光度/nm 波长 A 吸光度/nm 波长 A 430 0.143 510 0.216 440 0.153 515 0.214 450 0.164 520 0.205 460 0.176 525 0.189 470 0.192 530 0.165 480 0.200 540 0.111 490 0.202 550 0.070 495 0.204 560 0.044 500 0.209 570 0.031 505 0.213 580 0.022 波长与吸光度的关系 由图可见，当波长为510nm时吸光度最大，所以最佳波长为510nm。 2. 显色剂最佳用量的测定 取7只50ml容量瓶编号，分别加入5ml 10ug/ml 铁标准溶液，再加入1ml 10%盐酸羟胺溶液摇匀，冷却，2min后加入5ml1mol/L? NaAC 溶液,再分别加入0.1%邻二氮杂菲溶液0.3 、0.6、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0ml，定容，摇匀。一定时间后用1cm比色皿，以水为参比溶液，用分光光度计在510nm处，测定吸光度，并绘制吸光度——显色剂用量曲线，找出显色剂最佳用量。 邻二氮杂菲/ml 0.3 0.6 1.0 1.5 2 3 4 A 0.140 0.220 0.214 0.213 0.213 0.219 0.216 显色剂