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氨基酸的分离提纯刘艳梅周关华(东华大学环境科学与工程学院上海200051)摘要 国内外氨基酸分离与提纯的发展研究现状及其在生产实践中的应用。关键词氨基酸分离提纯应用氨基酸及其衍生物是组成蛋白质的基本单元，广泛用于医药、食品、饲料、化妆品工业等领域。例如，在食品加工和饲料工业，L-谷氨酸一钠可作为增鲜剂，L一天冬氨酸、甘氨酸和DI，-丙氨酸等也用作食品风味改良剂，另外，L一天冬酰苯丙氨酸甲酯作为低热量甜味剂fAspartame)，在国外已广泛应用于饮料等食品。L-赖氨酸和DL蛋氨酸广泛应用于改进饲料成份的营养价值。I，-赖氨酸还用于强化面粉和强化米的生产。在医药卫生方面，除了大量应用结晶氨基酸输液外，某些氨基酸及其类似物也被用于治疗某些疾病。例如L-多巴[L一3一(3，4一二轻基苯基)丙氨酸】是治疗帕金森氏病的重要药物，而仅一甲基一多巴为有用的降压药物。L一谷酰胺及衍生物用于治疗胃溃疡，L_色氨酸和5一羟基一L一色氨酸是有效的抗抑郁剂。另外某些氨基酸衍生物具有抗肿瘤的作用。一些肽类例如催产素，血管紧张肽和促胃液激素等，它们具有医疗效果的激素效应。氨基酸聚合物，例如聚一 一甲基一 谷氨酸已被用作人造革的原料。总之，氨基酸及其衍生物将会随着科学研究和工业生产的发展，而被更加广泛地应用【l】。然而，国内氨基酸的生产远不能满足其需求。1氨基酸的性质氨基酸是一种具有两性官能团的物质。氨基酸分子既含有氨基又含有羧基，在溶液中主要以一NH， ，一COO一形式存在。氨基和羧基的电离取决于溶液的pH值和氨基酸的等电点PI：在pH低于等电点P1时，羧基的电离被抑制，氨基酸带正电荷；在pH值高于等电点Pl时，氨基的电离被抑制而带负电荷。在等电点时，氨基酸的溶解度最小，最易从溶液中析出。按照侧链基团的不同，氨基酸可以分为3类：酸性氨基酸，中性氨基酸，和碱性氨基酸。而各种氨基酸的等电点不同，酸性氨基酸中性氨基酸碱性氨基酸。利用这个性质，可以把它们进行分离提纯圆。2氨基酸的分离与提纯氨基酸的分离提纯可采用沉淀、离子交换、溶剂萃取法、反向微胶团萃取、液膜萃取和电渗析等方法。最常用的是离子交换法。近年来，新的氨基酸分离提纯方法的研究十分活跃，报道最多的是反应萃取、反向微胶团萃取和液膜萃取等。2．1特殊沉淀法特殊沉淀法【l4】是最早应用于混合氨基酸分离的方法之一。某些氨基酸可以与一些有机或无机化合物结合，形成结晶性衍生物沉淀，利用这种性质向混合氨基酸溶液中加人特定的沉淀剂，使目标氨基酸与沉淀剂沉淀下来，达到与其他氨基酸分离的目的。较为成熟的工艺有：精氨酸与苯甲醛在碱性和低温条件下，可缩合成溶解度很小的苯亚甲基精氨酸，分离这种沉淀，用盐酸水解除去苯甲醛，即可得精氨酸盐酸盐吲；亮氨酸与邻一二甲苯-4一磺酸反应，生成亮氨酸的磺酸盐，后者与氨水反应得到亮氨酸【l1。特殊沉淀法虽然操作简单、选择性强，但是由于沉淀剂回收困难，废液排放污染加剧，残留沉淀剂的”毒性”等已逐渐被其他分离方法所取代。2．2离子交换法英国曾经成功地开发了将胱氨酸母液通过离子交换层析柱分离出精氨酸、组氨酸和赖氨酸圈；前苏联也有过以离子交换层析法从胱氨酸母液中提取精氨酸、组氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸和异亮氨酸的报道；国内的许多研究单位及胱氨酸生产单位开展了大量的关于离子交换法从蛋白水解液中提取氨基酸工艺的研究[1． ．7·81。尽管氨基酸的存在形态A±所呈现的净电荷为零，但是这类存在形态几乎不溶于普通有机溶剂中。因此，采用通常的溶剂萃取是不能奏效的。目前人们采用了两种形式的离子交换反应萃取。一种是在高pH下萃取氨基酸阴离子[91，另一种是在低pH下萃取氨基酸阳离子㈣。季铵盐(如甲基三辛基氯化铵TOMAC)和酸性磷氧类萃取剂[如二(2一乙基已基)磷酸D2EHPA]是典型的阴离子萃取剂和阳离子萃取剂。Nato等人[11】研究了高pH时，TOMAC对各种氨基酸的萃取平衡。氨基酸阳离子和季铵盐阳离子之间发生离子交换。不同氨基酸的萃取平衡常数有很大的差异。对色氨酸所获得的萃取平衡常数最大。它是甘氨酸萃取平衡常数的260倍。萃取平衡常数KA值同Nazaki等人提出的氨基酸的亲油比关联较好。Haensel[-删等人用TOMAC作载体对D，L一苯丙氨酸的反应萃取作了平衡研究。由于缓冲离子与OH一竞争萃取，平衡常数受到初始pH值的影响。另外，氨基酸的浓度越低，则季铵盐浓度对分配系数的影响就越大。在实验室规模的脉冲筛板塔中，氨基酸反应萃取实验结果表明[121，季铵盐对氨基酸的反应萃取存在一定的障碍。由于季铵盐较高的表面活性，使脉冲筛板塔中的反应萃取操作限