斜带石斑鱼igmigz和igd重链基因的克隆.pdfVIP

第36 卷第7 期 水 产 学 报 Vol.36, No.7 2012 年7 月 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA July, 2012 文章编号: 1000-0615(2012)07-1000-11 DOI:10.3724/SP.J.1231.2012.27973 斜带石斑鱼 IgM 、IgZ 和 IgD 重链基因的克隆 1,2 1,2 1 1* 黄 贝 , 陈善楠 , 徐 镇 , 聂 品 (1. 中国科学院水生生物研究所, 淡水生态与生物技术国家重点实验室，湖北 武汉 430072; 2. 中国科学院研究生院, 北京 100039) 摘要: 应用 RACE 方法获得斜带石斑鱼膜结合型免疫球蛋白 M(membrane-bound immu- noglobulin M, mIgM), 膜结合型免疫球蛋白 D(mIgD), 分泌型免疫球蛋白 Z(secretory immu- noglobulin Z, sIgZ) 的重链基因。斜带石斑鱼膜结合型IgM 重链恒定区包含3 个恒定区结构 域(μ1, μ2, μ3) 以及两个跨膜外显子(TM1, TM2), TM1 外显子与μ3 结构域末端相连接。氨基酸 序列相似性分析结果显示,斜带石斑鱼 mIgM 各恒定区与牙鲆 mIgM 恒定区相似性最高, 为 53%~78%。mIgD 的cDNA 全长为3 375 bp, 开放阅读框包含3 006 bp ，其恒定区由1 个µ1 外显子, 7 个δ外显子以及跨膜区组成。斜带石斑鱼IgD 恒定区与鳜IgD 各恒定区氨基酸序列 相似性最高, δ1~δ7 的相似性分别为75.5%、75.8%、65.4%、76.6%、88.1%、90.6%、82.8%, TM 结构域为82.7%。sIgZ 的基因结构与其他硬骨鱼类sIgZ 的结构相似, 包括4 个外显子和3 个内含子, 内含子长度分别为222 、129 和458 bp 。利用半定量PCR 分别检测了这3 种基因在 斜带石斑鱼各器官/ 组织中的表达, 发现 mIgM 在头肾、肾脏、脑、脾脏、肠、鳃、心脏和 胸腺中均有表达; mIgD 的mRNA 在头肾、肾脏以及胸腺中有较高的表达, 在肠中表达量较 低; sIgZ mRNA 主要分布于淋巴组织如头肾、肾及脾脏中, 而在鳃、心脏和胸腺中的丰度较低。 关键词: 斜带石斑鱼; 免疫球蛋白; 膜结合型免疫球蛋白 M; 膜结合型免疫球蛋白 D; 分泌 型免疫球蛋白Z 中图分类号: Q 785;S 917.4 文献标志码: A 免疫球蛋白(immunoglobulin, Ig)是免疫系统 硬骨鱼类IgM 有分泌型和膜结合型两种形式, 中的重要组成部分, 目前，在硬骨鱼类中已发现了 其重链基因分别包含 4 个和 3 个恒定区[3, 5] 。IgD [1-3] IgM 、IgD 、IgZ(亦称 IgT) 、IgH 和 IgM-IgZ 。 重链() 的基因结构在不同鱼类中存在差异。如斑 硬骨鱼类免疫球蛋白转录过程与哺乳动物相似, 点叉尾 (Ictalurus punct