【名师导学】高考生物一轮复习-2.68 分解纤维素的微生物的分离课件 新人教版选修1.pptVIP

* 第六十八课时　分解纤维素的微生物的分离 考点一　分解纤维素的微生物的分离 【基础知识整合】 1．纤维素：是一种由 首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的 物质。 是自然界中纤维素含量最高的天然产物。有些微生物能分解利用纤维素，因为它们能够产生 。 2．纤维素酶：是一种复合酶，一般包括 酶、 酶和 酶。前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶能将纤维二糖分解成 。 葡萄糖 多糖类 棉花 纤维素酶 C1 CX 葡萄糖苷 葡萄糖 3．筛选纤维素分解菌的方法是 。该方法可以通过 反应直接筛选。 其原理是：刚果红可以与纤维素形成 ，当纤维素被 分解后，红色复合物无法形成，出现以 为中心的 ，我们可以根据 来筛选纤维素分解菌。 4．纤维素分解菌大多分布在富含 的环境中，也可以将富含纤维素的物质埋在土壤中，经过30天左右，再从已腐烂的物质埋藏处筛选 。 刚果红染色法 颜色 红色复合物 纤维素酶 纤维素分解菌 透明圈 是否产生透明圈 纤维素 纤维素分解菌 5．在将样品稀释涂布到 的培养基上之前，可以用 增加纤维素分解菌的浓度。培养时要在 培养。 6．常 用 的 刚 果 红 染 色 法 有 两 种：一 种 是 ，再加入 ；另一种是 。 7．为确定得到 的 是 纤 维 素 分 解 菌，尚 需 进 行 的实验，纤维素酶的发酵方法有 发酵和 发酵两种。纤维素酶的测定方法一般采用对纤维素酶分解滤纸等纤 维 素 后所产生的 进行定量测定。 鉴别纤维素分解菌 选择培养基 摇床上振荡 先培养微生物 刚果红染色 在倒平板时就加入刚果红 发酵产纤维素酶 液体 固体 葡萄糖 【知识拓展】 1．实验原理 即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 2．两种培养基 (1)纤维素分解菌的选择培养基——液体培养基 上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1 000 mL 氮源、生长因子 0.5g 水解酪素 生长因子、碳源、氮源 0.5g 酵母膏 0.5g KCl 0.5g MgSO4·7H2O 0.9g KH2PO4 1.2g Na2HPO4·7H2O 无机盐 1g NaNO3 碳源、能源 5g 纤维素粉 提供的主要营养物质 含量 组分 (2)鉴别纤维素分解菌的培养基——固体培养基 上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000 mL 碳源 100mL 土豆汁 凝固剂 15g 琼脂 无机盐 0.25g KH2PO4 碳源、氮源、生长因子 1g 酵母膏 碳源 5～10g CMCNa 提供的主要营养物质 含量 组分 3．实验流程 经过刚果红鉴别培养基培养后，在产纤维素酶的菌落周围会出现透明圈。可以用单细胞挑取法挑取纤维素分解菌。为确定得到的是纤维素分解菌，还需进行发酵产纤维素酶的实验，通常有液体发酵和固体发酵两种 常用的刚果红染色法有两种：一种是先培养微生物，再加入刚果红染色；另一种是在倒平板时就加入刚果红 可以参照上一课题样品的稀释方法进行 在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上之前，可以用选择培养基增加纤维素分解菌的浓度。培养时要在摇床上振荡培养 纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中，也可以将富含纤维素的物质埋在土壤中，经过30天左右，再从已腐烂的物质埋藏处筛选纤维素分解菌 土壤取样 ↓ 选择培养 ↓ 梯度稀释 ↓ 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落 操作中的注意事项 实验流程 4.两种常用刚果红(CR)染色