三疣梭子蟹profilin基因全长cdna的克隆与表达分析.pdfVIP

动 物 学 研 究 2010，Jun. 31(3) ：261−267 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research DOI ：10.3724/SP.J.1141.2010.03261 三疣梭子蟹 Profilin 基因全长 cDNA 的克隆与表达分析 申 望, 叶 茂, 石 戈, 王日昕* （浙江海洋学院海洋科学学院海洋生物资源及分子工程实验室，浙江 舟山 316004 ） 摘要：三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus ）是我国沿海重要养殖品种之一。近年来，养殖病害呈逐年上升 趋势，制约了三疣梭子蟹养殖产业的健康可持续发展。克隆三疣梭子蟹免疫相关基因、研究免疫基因的功能和作 用机制，可为三疣梭子蟹养殖病害的防治奠定基础。本研究从三疣梭子蟹血细胞全长cDNA 文库中克隆了742 bp 的profilin 基因全长cDNA 。该profilin 全长cDNA 中开放阅读框长375 bp，编码125 aa。推导的三疣梭子蟹profilin 理论等电点pI 5.87 ，氨基酸序列与冈比亚按蚊（Anopheles gambiae ）profilin 同源性最高，序列一致性为42.9% 。 荧光定量RT-PCR 分析结果显示，在正常的三疣梭子蟹机体中，血细胞profilin 表达水平最高，其次为肝胰脏；在 致病菌副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）诱导后，血细胞中profilin 表达量显著上升（P0.01 ），表明profilin 可能参与了三疣梭子蟹的免疫防御反应，是一个免疫相关因子。 关键词：三疣梭子蟹；免疫；基因克隆；Profilin ；基因表达 中图分类号：Q959.223.63; Q349; Q78 文献标志码：A 文章编号：0254-5853-(2010)03-0261-07 cDNA Cloning, Characterization and mRNA Expression of a Profilin from the Swimming Crab Portunus trituberculatus * SHEN Wang, YE Mao, SHI Ge, WANG Ri-Xin (Laboratory of Marine Biology Resources and Molecular Engineering, Ocean Science College, Zhejiang Ocean University, Zhoushan 316004, China) Abstract: We isolated and characterized the profilin full-length cDNA from hemocytes of swimming crab Portunus trituberculatus. The profilin cDNA consists of 742 bp and the 375 bp open reading frame encodes a polypeptide of 125 amino acids, having a predicted isoelectric point of 5.87. The deduced amino acid sequence shows 42.9% amino acid sequence identity to the profilin of mosquito Anopheles gambiae . The profilin mRNA was highly expressed in hemocytes and moderately in