短乳杆菌NCL912连续培养生产γ-氨基丁酸分析研究.pdfVIP

摘要 agb；3 摘要 、一,I Y．氨基丁酸(丫．aminobutyricacid，GABA)是一种天然存在的非蛋白氨基 酸，具有重要的生理活性，在医药、食品等行业具有广泛的应用前景。本研 究以短乳杆菌NCL912作为生产菌株，建立了短乳杆菌NCL912连续培养方 法用于GABA的生产。在连续培养条件下，对短乳杆菌NCL912的发酵动力 学、菌体生长和GABA产物合成特性进行了研究，为菌株的连续培养和GABA 的生产提供了可行的技术路线以及理论基础。主要研究结果如下： 1建立了预染薄层色谱方法用于发酵过程GABA合成的监测。对传统薄 层色谱进行改进，直接将茚三酮加入展开剂中，色谱分析步骤减少为点样、 展开和显色三个步骤。实验表明，改进的方法适用于22种天然氨基酸的检测， 并且能用于发酵液中GABA检测和分离。与传统薄层色谱相比，预染薄层色 谱方法简便有效。 2首次成功建立了短乳杆菌NCL912连续培养生产丫．氨基丁酸的方法。 5．0、150r／min条件下，通过考察不同稀释率(O．06、0．08、0．10、 在32℃、pH O．12和O．14ho)时，连续培养体系中菌体浓度、葡萄糖利用和GABA产量三 项指标的变化，研究了稀释率对连续培养的影响。结果表明：当稀释率为0．06 h．1时，反 和0．14h．1时，培养不能达到稳态；当稀释率为O．08、O．01及0．12 应体系均能进入稳态。短乳杆菌NCL912连续培养方法能够实现GABA的连 续、高效生产。 h。1条件下，对短乳杆菌NCL912 3在稀释率为O．08、0．09、0．10、0．11和0．12 连续培养动力学进行了研究。葡萄糖限制条件下的菌体生长动力学模型为： 只与反应体系中菌体浓度有关。 4在稀释率为O．08、0．09、0．10、O．1l和O．12h‘1条件下，对连续培养发 酵体系下的菌体生长和GABA产物合成特性进行了研究。结果表明：与分批 发酵相比，连续培养可以显著提高菌体产率和GABA的合成效率。在连续培 养体系中，稀释率为O．1lh．‘时，菌体产率达最大值83．5meJL．h；葡萄糖／MSG 需求比在一定范围内波动，直到高稀释率(O．12h’1)时大幅下降；在GABA合 成方面，0．09h．1是较为适宜的稀释率，此时，GABA产量和产率分别达到最 Ⅱ 摘要 大值56．7423 068 g／L和5．1g／L·h。 关键词：短乳杆菌NCL912；连续培养；丫-氨基丁酸；发酵动力学 III ABSTRACT ABSTRACT a aminoacidwhichis Gamma·aminobutyricacid(GABA)isnonprotein distributedin has aSafunctionalbioactive widely organisms．GABApotential becauseofthewell infoodand known component pharmaceuticals physiological this cont