- 1、本文档共10页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
细粒棘球蚴EgG1再162基因进化分析表达及鉴定
中国生物工程杂志摇 悦澡蚤灶葬月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁圆园员远袁猿远渊源冤院苑愿鄄愿苑
阅韵陨院员园援员猿缘圆猿辕躁援糟遭援圆园员远园源员圆
细粒棘球蚴耘早郧员再员远圆基因进化分析尧表达及鉴定鄢
员鄢鄢 员鄢鄢 员 圆鄢鄢鄢 员袁圆鄢鄢鄢
祖力皮也 窑吐尔逊 摇 曹春宝 摇 温摇 浩 摇 丁剑冰 摇 德力夏提 窑依米提
渊员新疆重大疾病医学实验室鄄省部共建国家重点实验室培育基地摇 新疆医科大学第一附属医院摇 乌鲁木齐摇 愿猿园园缘源冤
渊圆新疆医科大学科研处摇 乌鲁木齐摇 愿猿园园员员冤
摘要摇 目的院克隆和鉴定细粒棘球蚴的耘早郧员再员远圆基因袁分析其蛋白表达和适应性进化并鉴定抗原
性遥 方法院根据藻皂再员远圆基因序列设计引物袁分别从细粒棘球绦虫原头蚴尧囊壁生发层尧成虫和虫卵
四个发育阶段袁提取基因组阅晕粤和总砸晕粤袁皂砸晕粤反转录为糟阅晕粤袁利用孕悦砸 的方法以基因组阅晕粤
和糟阅晕粤为模板扩增耘早郧员再员远圆基因曰构建孕哉悦皂鄄栽辕耘早郧员再员远圆 重组质粒袁经孕悦砸尧酶切及测序鉴定
后袁测序确定其正确性遥 利用阅晕粤皂葬灶软件与酝耘郧粤源软件对耘早郧员再员远圆基因特点进行分析并构建
耘早郧员再员远圆核酸序列的进化树进一步探讨其同源性遥 荧光定量孕悦砸检测耘早郧员再员远圆基因在细粒棘球
绦虫原头蚴尧囊壁生发层尧成虫和虫卵四个不同发育阶段的表达情况遥 利用定向克隆技术将
耘早郧员再员远圆抗原基因片段克隆至原核表达质粒孕耘栽鄄源员葬上袁通过酶切分析和孕悦砸 鉴定筛选出阳性克
隆袁测序确定序列遥 陨孕栽郧初步诱导和表达耘早郧员再员远圆鄄郧杂栽 重组蛋白袁通过杂阅杂鄄孕粤郧耘 电泳和宰藻泽贼藻则灶
遭造燥贼试验分析鉴定遥 结果院从细粒棘球绦虫的两个不同发育阶段均克隆出耘早郧员再员远圆 基因袁从总
阅晕粤克隆得到片段长度员远愿园遭责袁从糟阅晕粤 克隆得到片段长度源缘怨遭责遥 相似性比较表明袁耘早郧员再员远圆
基因序列与藻皂再员远圆相似性为怨员豫袁而耘早郧员再员远圆基因糟阅晕粤与藻皂再员远圆相似性为怨缘豫遥 进一步分
析显示袁耘早郧员再员远圆基因序列由猿 个外显子和圆 个内含子组成袁外显子区域分别为员耀苑园袁员园远源耀
员猿愿园和员缘苑苑耀员远源愿遥 位于疏水端员耀员远位氨基酸构成耘早郧员再员远圆信号肽序列袁猿缘耀员员缘位氨基酸形
成一个大的纤黏连蛋白剪接体云晕猿袁员猿猿耀员缘圆位氨基酸构成羧基端跨膜区域遥 测序结果显示
耘早郧员再员远圆抗原基因长度为猿远园遭责袁编码员圆园个氨基酸遥 通过荧光定量孕悦砸检测袁发现耘早郧员再员远圆在
成虫尧生发层阶段尧原头蚴和虫卵阶段均有不同程度的表达遥 但是耘早郧员再员远圆在成虫中的表达量最
多袁相对值为员怨援缘圆远袁差异有统计学意义渊孕约园援园员冤袁其次生发层阶段袁为缘援员圆圆袁再次在原头蚴阶段袁
相对值为缘援园愿猿袁而在虫卵阶段最少袁为员援远缘愿愿遥 构建的孕耘栽鄄源员葬辕耘早郧员再员远圆原核表达质粒袁经陨孕栽郧
诱导后袁杂阅杂鄄孕粤郧耘检测表明耘早郧员再员远圆鄄郧杂栽重组蛋白得到成功表达袁在相对分子量为源源噪阅葬 处有表
达条带遥 宰藻泽贼藻则灶遭造燥贼 分析显示阳性印迹条带袁分子量为源源噪阅葬袁耘早郧员再员远圆重组蛋白能与细粒棘球蚴
感染源园 天后犬的血清发生反应曰与包虫病患者血清也有阳性反应遥 结论院成功克隆耘早郧员再员远圆抗原
基因袁序列对比分析显示耘早郧员再员远圆 的糟阅晕粤与藻皂再员远圆 的糟阅晕粤具有很高的相似性袁基因的差异性
主要存在于内含子区域袁耘早郧员再员远圆抗原基因是一种新的基因遥 耘早郧员再员远圆在成虫中的表达量最多遥
成功诱导表达出耘早郧员再员远圆重组蛋白袁并且耘早郧员再员远圆重组蛋白具有很好的抗原性遥
关键词摇 耘早郧员再员远圆 抗原摇 进化树摇 荧光定量孕悦砸摇 原核表达
中图分类号摇 匝愿员怨
收稿日期院圆园员缘鄄园怨鄄员远摇 摇 修回日期院圆园员缘鄄员圆鄄猿员
鄢国家自然科学基金渊猿员园园园源员员袁愿员员远园猿苑愿冤资助项目
鄢鄢并列第一作者
鄢鄢鄢通讯作者袁电子信箱院泽怎泽葬灶愿泽愿岳员圆远援糟
您可能关注的文档
- 第十七章肝的生物化学教案-赣南医学院.DOC
- 第十三届联合国预防犯罪和刑事司法大会-UnitedNationsOfficeon.PDF
- 第十三篇用间篇先知者.PPT
- 2014年初四综合测试.DOC
- 第十二课最后一课.PDF
- 第十七章胺Amines.DOC
- 第十周-河北科技大学理学院.DOC
- 第十六课-5rbzcom.PPT
- 2013第八届钟灵化学创意竞赛笔试试题.PDF
- 2014年分子生物学复习题.DOC
- 北师大版(2024)八年级数学上册课件 3.2 平面直角坐标系 第2课时 点的坐标特征.pptx
- 北师大版(2024)八年级数学上册课件 3.2 平面直角坐标系 第3课时 建立适当的平面直角坐标系.pptx
- 北师大版(2024)八年级数学上册课件 4.3 一次函数的图象 第1课时 正比例函数的图象及性质.pptx
- (人教A版数学选择性必修三)讲义第15讲7.1.1条件概率(学生版+解析).docx
- (人教A版数学选择性必修三)讲义第19讲8.1成对数据的统计相关性(8.1.1变量的相关关系+8.1.2样本相关系数)(学生版+解析).docx
- 北师大版(2024)八年级数学上册课件 5.2 二元一次方程组的解法 第2课时 加减消元法.pptx
- (人教A版数学选择性必修一)2025年秋季学期讲义第01讲1.1.1空间向量及其线性运算(学生版+教师版).docx
- 北师大版(2024)八年级数学上册课件 5.2 二元一次方程组的解法 第1课时 代入消元法.pptx
- 北师大版(2024)八年级数学上册课件 5.3 二元一次方程组的应用 第3课时 二元一次方程组的应用(3).pptx
- 北师大版(2024)八年级数学上册课件 5.4 二元一次方程与一次函数 第2课时 用二元一次方程组确定一次函数表达式.pptx
文档评论(0)