葛根总黄酮指纹图谱数据分析方法探讨.PDFVIP

维普资讯 第3o卷第 1期 中国 中药杂 志 Vo1．30．Ise1 2O05年 1月 January，2005 葛根总黄酮指纹图谱数据分析方法探讨 郑一敏 ，胥秀英2，傅善权2 (1．重庆大学生物力学与组织工程教育部重点实验室，重庆400044； 2．重庆市中药研究院，重庆 400065) 中药指纹图谱是指中药所共有的特征性的某类 2．2 供试品溶液的制备 化学成分的色谱或光谱的特征性图谱。目前，指纹 取葛根黄酮提取物，用60％甲醇溶解制成 1．0g· 图谱的测定多采用高效液相色谱法，评价指标一般 LI1的溶液，0．45a／n膜滤过，滤液作为供试品溶液。 为各共有色谱峰定量化表征参数，如保留时间、峰面 2．3 葛根素对照品溶液的制备 积或峰高值…1，缺乏各共有色谱峰定性量化的表征 取葛根素对照品一定量，用60％甲醇溶液溶解 参数，难以体现指纹图谱整体性2【]。本研究以葛根 制成0．2g·LI1的溶液，0．45a／n膜滤过，滤液作为对 黄酮中有效成分葛根素为标准参照物，采用高效液 照品溶液。 相色谱法，通过对 10批葛根总黄酮进行测定，选用 2．4 方法学考察与结果 各共有峰的保留时间、峰面积百分数、峰高百分数、 2．4．1 专属性试验 取空白溶剂、葛根素对照品与 光谱相似系数、3点纯度系数为表征参数，建立了葛 葛根黄酮供试品溶液，分别在上述色谱条件下测定， 根总黄酮指纹图谱模式标准，采用模式识别方 结果样品溶剂不干扰测定，葛根素对照品色谱峰、葛 法[3-5]，分别对3批样品中的共有峰与模式标准中的 根总黄酮中葛根素对应峰经二极管阵列检测器分 共有峰进行了分析，计算出样品中的共有峰与模式 析，色谱峰纯度达0．9996(图1)。 标准中的共有峰的相似系数，从而较为直观地判别 l 待测样品与标准的差异大小。该方法稳定，可行，现 报道如下。 1仪器与试剂 岛津液相色谱仪 (包括 LC一6AD泵、SPD— M10AVP二极管检测器、SCL一10ATVP控制器、CTO 一 10ASVP柱温箱、CLASs—VP6．1数据工作站) 葛根素对照品(中国药品生物制品检定所，批号 o752B06)；葛根总黄酮由本实验室 自制；甲醇为分 图1葛根素对照品与葛根黄酮样品色谱图 1．葛根素；A．葛根素对照品；B．葛根黄酮样品 析纯；水为重蒸馏水。 2．4．2 稳定性试验 取同一供试品溶液，在上述色 2 方法与结果 谱条件下，分别于0，2，4，8，16h检测，以葛根素对应 2．1 色谱条件 峰为标准峰，其主要共有峰的相对保留时间稳定，经 参考文献[6]并经过筛选试验，确定最佳色谱条 CIA．svP6．1软件处理，各共有峰的相对保留时间 件为：PhenomenexIamaC18色谱柱(4．6lnlTlX150lnlTl， RSD1．99％，峰面积RSD2．59％，峰高百分数RSD 5a／n)，流动相甲醇．水(23：77)，柱温25℃，检测波 2．83％，3点峰纯度RSD2．11％，相似性系数RSD为 长250肿 ，流速 1．0mL·rain～，进样量：供试品与对