dna的复制和损伤修复.ppt

复制的方式 ——半保留复制(semi-conservative replication) 双向复制(bidirectional replication) 半不连续复制(semi-discontinuous replication) 逆转录过程中cDNA的合成 逆转录病毒的生活周期 DNA的突变 DNA突变的类型 DNA聚合酶和连接酶以未损伤的DNA链为模板修补缺口。 （三）核苷酸切除修复系统识别DNA双螺旋变形 核苷酸切除修复（nucleotide excision repair, NER）系统识别DNA双螺旋形状的变形。 E.coli的核苷酸切除修复系统（NER）： ?UvrA识别DNA双螺旋结构变形 ?UvrB负责解链，募集核酸内切酶UvrC ?UvrC在损伤部位的两侧切断DNA链 ?UvrD去除这两个切点之间的DNA片段 ?DNA聚合酶Ⅰ和连接酶填补缺口 XPC蛋白负责发现DNA双螺旋中的变形 XPA 和XPD蛋白具有解旋酶活性 核酸酶ERCC1-XPF切割损伤部位5’侧，XPG切割3’侧 DNA聚合酶和连接酶负责填补产生的缺口 高等真核生物的NER作用： 正在复制的DNA聚合酶可能遭遇尚未修复的DNA损伤，细胞自动防故障系统能够使复制体绕过损伤部位，这一机制就是跨损伤DNA合成。 E.coli跨损伤DNA合成由UmuC-UmuD′复合物进行。 （四）跨损伤DNA聚合酶能够跨越损伤部位合成DNA E.coli 跨损伤DNA合成 （发生在复制后）：复制时，跳过损伤部位，新链产生缺口由母链弥补，原损伤部位并没有切除,但在后代逐渐稀释。 （五）重组修复系统 当DNA分子的损伤面较大，还来不及修复完善进行复制时，损伤部位因无模板指引，复制出来的新子链会出现缺口，这时，就靠重组蛋白RecA的核酸酶活性将另一股健康的母链与缺口部分进行交换，以填补缺口。 （六）SOS修复 当DNA损伤广泛难以继续复制时，由此而诱发出一系列复杂的反应。 在E. coli，各种与修复有关的基因，组成一个称为调节子(regulon)的网络式调控系统。 这种修复特异性低，对碱基的识别、选择能力差。通过SOS修复，复制如能继续，细胞是可存活的。然而DNA保留的错误较多，导致较广泛、长期的突变。 三、DNA损伤修复具有重要的生物学意义 修复系统的存在保证了物种遗传的稳定性，对降低修复缺陷相关疾病的发病率有十分重要的意义。 5.真核生物有多种DNA聚合酶,DNA聚合酶δ是真正的复制酶。 6.真核生物线性染色体两端有端粒结构，它是由许多成串的重短复序列组成，端粒功能是稳定染色体末段结构，防止染色体间的末端连接，并可补偿滞后链5’-末段在消除RNA引物后造成的空缺，使染色体保持一定长度。 Pol ?/引发酶 合成RNA-DNA引物 Pol ? 合成前导链和后随链 RFC 识别引物DNA的3?端并驱除Pol ?/引发酶 PCNA 结合DNA并引入Pol ? RNAse H I/FEN1 切除冈崎片段5?端的RNA引物 真核生物复制过程中酶及功能 Pol ?（或Pol ?） 填补冈崎片段之间的空隙 DNA连接酶Ⅰ 封口 RPA 稳定解旋后的单链DNA 解旋酶 复制叉的形成和移动必不可少 拓扑异构酶 释放复制叉前进时产生的扭曲应力 真核复制叉有1个Pol ?和2个Pol ?复合物 真核DNA复制叉模型 前导链：出现在引发后期 后随链：发生于每个冈崎片段合成之际 发生DNA聚合酶?/?转换的原因是Pol ?不具备持续合成能力 DNA聚合酶?/?转换 真核所有染色体DNA复制仅仅出现在细胞周期的S期，而且只能复制一次。 真核染色体在每个细胞周期中只能复制一次 在原核细胞中，复制基因的识别与DNA解旋、募集DNA聚合酶偶联进行。而在真核细胞中，这两个阶段相分离可以确保每个染色体在每个细胞周期中仅复制一次。 端粒酶确保染色体末端复制完整 前导链产生完整的子染色单体。 后随链3?端留下缩短的未复制的ssDNA区。 端粒（telomeres）由富含TG的重复序列组成。 人的端粒重复序列为5’-TTAGGG-3?。 这些重复序列多为双链，但每个染色体的3’端比5?端长，形成单链ssDNA。这一特殊结构可解决染色体末端复制问题。 端粒酶（telomerase）是一种核糖核蛋白（RNP），由RNA和蛋白质组成。 端粒酶以自己的RNA组分作为模板，以染色体的3?端ssDNA（后随链模板）为引物，将端粒序列添加于染色体