姜黄素对人肝癌Bel7402细胞杀伤动力学及周期时相的影响.pdfVIP

维普资讯 236 JournalofFujianMedicalUniversity Vo1．32 Sep-1998 一 )7 姜黄集对人肝癌Bel7402细胞杀伤动力学 及周期时 △ 兰兰 苎— 柯丹如黄自强 ／7一 目的 研究姜黄素对人肝癌 Be17402细胞杀伤动力学及周期时相的影响。 方法 以集落形 成法测定药物对增殖期与坪期细胞杀伤的量效关系曲线．以流式细胞仪及Ao／EB荧光染色法分 析药物对Bel7402细胞周期时相及捅亡的影响。 结果 姜黄素 1～10~g／ml作用2h对不同增 殖状态的Bel7402细胞均呈单指数型杀伤．但对增殖期细胞较敏感-】～10~g／ml作用24h，Ga—Gt 期细胞厦 G一M 期细胞的比例呈剂量依赖性减少，S期细胞及凋亡细胞的比例呈剂量依赖性增加 结论 姜黄素属于优势杀灭增殖期细胞的周期时相非特异抗癌药．诱导肿瘤细胞捅亡是其重要 的作用方式。 关键词 姜黄紊； 细胞周期 { 凋亡 _ _ 。 ～ - _ ‘_ ’ - 一 叶稿伽舱 姜黄素(Curcumin)系从姜科植物姜黄 细胞引 自中科院上海药物所，培养于含 1O 中提取的酚性色素，有抗氧化、抗突变、抗促 新生牛血清、100IU／ml青霉素、100~g／ml 癌、抗炎、抗血小板、降血脂等广泛的药理作 链霉素的PRMI1640培养液传代、培养。取 用 ]，但对其直接的抗肿瘤作用报道较少 作 指数生长期的细胞用于实验 者前文报道 ，姜黄素对 MGC803、Be1740Z、 1．3 指数生长期与坪期细胞的制备L4 B16、K562、K562／ADM 均有 明显 的体外杀 Be17402细胞接种于常规培养液中，24h即 伤作用．并且对 B16、EAC等均有显著的体 进入指数生长期；接种后48h当细胞长满瓶 内抗癌作用。有关姜黄素对肿瘤细胞杀伤动 底时，换含 0．25 新生牛血清的培养液，蝎 力学与周期时相的影响未见文献报道。本文 h后，洗弃脱落细胞，留下部分即为坪期细 进一步研究姜黄素对 3／e17492细胞杀伤动力 胞 。 学及周期时相的影响。 1，4 存活率测定 采用集落形成法口]，实验 组及对照组各 3例，前者加入一定浓度的药 1 材料与方法 物，后者加入等量溶剂t作用 2h后，接种于 1．1 药品与试剂 姜黄索按文献[3]由本所 24孔培养板中t200个细胞／孔t加培养液 1 从福建建阳地区产的姜黄(Curcuma Longa mlt于 37℃，5％co2培养 7～1O天t结晶紫 L．)中提取、分离，经硅胶薄层鉴定，与标准 染色，计数集落数，多于5O个细胞者计为集 品的 比移值相 同。吖啶橙 (AO)及溴乙锭 落。存活率：给药组集落数 ／对照组集落数× (EB)为Fluka公司产品 流式细胞仪DNA 100 。 含量测定试剂盒 (Kinesis50)为BIO—RAD 1．5 量效关系曲线分析 以药物浓度对 产品。 细胞存活率的对数值做线性回归，计算 D 1．2 细胞株及培养条件 人肝癌Be17402 值 (D。为使细胞存活率下降63 的药物浓 度)。 *：福建省教委科研基叠资助课题(K96037) 福建医科大学临床荮理研究所，福建医科大学药理学教研 一 1／(2303Xb) b为量效关系曲线之斜率． 室(福州 350004) 维普资讯